세포 분리 및 배양 실험

본문내용

.0052
7
0.245
0.0062
8
0.279
0.0051
9
0.2823
0.006
평균
0.23
0.01
위의 그래프와 표의 값을 토대로 비선형 회귀 분석으로 공식이 만들어져 있다. 그 식은 다음과 같다.
- Nonlinear Regression
`^{ }
L(t)`=`m_{ 1` } `+`m_{ 2 } ```` TIMES [1-e^{ -m_{ 0 } TIMES m_{ 3 } } ]
- 3-parameter physical modeling and corresponding equation converted from nonlinear regression
L(t)= { phi alpha Delta Rho } over { pi kappa _{ 1 } } [1- { kappa _{ 2 } } over { kappa _{ 1 } + kappa _{ 2 } } e^{ - { T } over { tau } } ]
( = 2.1 and a = inner radius of the pipette)
mu = { tau kappa _{ 1 } kappa _{ 2 } } over { kappa _{ 1 } + kappa _{ 2 } }
E
`_{ inst }
=3/2(k
`_{ 1 }
+k
`_{ 2 }
) and E
`_{ equil }
= 3/2k
`_{ 1 }
토의 및 고찰
1. 이번 실험은 생체내의 세포를 증식 및 배양시켜 그 세포를 생체에 직접적으로 이용하기 위함이다.
2. 세포를 채취하는 과정에서 돼지 Knee의 연골을 되도록 얇게 잘라내어야 한다. 보다 정확하고 확실한 세포를 채취하기 위함이다. 이 과정에서 오염물질이 섞이게 되면 실험의 정확성도가 떨어진다.
3. 실험 과정에서 배지를 첨가할 때도 항상 청결을 유지하고 오염물을 차단함은 필수 조건이다. 하나의 바이러스가 세포를 오염시키게 된다.
4. KCl, NaCl, Na3, PO4, CaCl2, MgSO4, 등과 같은 염류 (salts)와 glucose, vitamins, amino acids, sodium pyruvate등과 같은 영양분, 그리고 pH7의 중성용액상태를 유지해주는 완충용액을 넣어주어야 한다. 세포 배양 배지에는 이들 이외에도 세균의 증식을 막기 위하여 항생물질을 넣어주어야 하며, 세포의 성장을 자극하기 위하여 성장인자 (growth factors)가 함유된 소혈청 (fetal bovine serum)을 넣어주어야 한다.
5. 세포의 증식은 2차원적으로 일어난다. 그래서 증식을 하면서 벽을 만나게 되면 더 이상 자라나지 못하게 된다. 그 세포를 다른 배양접시로 나누어 옮기는 것을 passage 라고 한다.
6. 모든 세척 또는 원심분리 중에 그 횟수를 적당히 조절해야한다. 세포가 죽을 수가 있기 때문에 3회 정도가 적당하다.
7. Micropipette을 이용한 Aspiration 실험에서 원리는 pipette의 반대편에서 음압을 걸어줌으로써 세포가 빨려 들어오는 정도를 측정하여 그 값을 나타낸다.
8. 실험 결과를 분석하여 보면 처음에 급속히 빨려 들어오다가 어느 정도의 시간이 흐르면 그 값은 점차적으로 완만한 기울기 나타내내며 변화한다.
9. 이번 실험에서 E1과 E2의 값을 알아보고자 하였는데 그 공식이 복잡하고 증명의 방법을 잘 알지 못했다. 하지만 결과 그래프를 보면서 세포의 물성치 특성을 알아볼 수 있다.
10. 그래프에서 기울기가 두개 나타난다. 두 가지의 평균을 내어 보았다. 첫 번째의 기울기는0.23, 두 번째 기울기는 0.01 로 나타났다. 결과를 볼 때 두 번째의 기울기는 거의 수평하게 나타났다. 이 값은 E1과 E2 값의 관계가 잘 나타나있다.

키워드

세포 배양,   세포분리,   Micropipette