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Electrophoresis kit
3. 실험 방법
① 1% agarose gel을 준비한다.
0.5X TAE 50ml에 0.5 g을 넣고 끓인 후, 틀에 붓고 30분간 굳힌다.
② DNA 용액 10ul에 6X loading dye 2ul를 섞어 gel에 loading 한다.
lane 1 : Size marker
lane 2-n : DNA
③ 전기영동 100V, 40분
④ EtBr 용액에 gel을 2
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겔전기영동 [Gel electrophoresis]
DNA나 RNA, 단백질과 같은 큰 분자들을 전기적인 힘을 이용하여 겔에서 이동시켜 크기에 따라 서로 분리하는 기술이다.
겔은 콜로이드(colloid) 용액이 굳어진 상태를 말하는 것이다. 전기영동이란 말은 전기적인 힘
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겔의 매질로부터 간섭 없이 보다 간단하게 검출할 수 있다.
(6) 면역 전기영동
어떤 분리기법의 분리력은 만약 검출 또는 가시화의 어떤 특이한 형태로 병합된다면 크게 개선될 수 있으며 그 일례가 면역 전기영동(immunoelectrophoresis)법이다. 한
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직임은 더욱 느려지므로 작은 DNA 분자까지 분리할 수 있게 된다. 아래의 여러 농도의 아가로스 겔에서 전기영동한 DNA 크기 표지자(ladder)들을 나타낸 다음 장의 그림을 보면 알 수 있듯이 1.5%와 1% 아가로스겔에서는 0.1kb의 DNA까지 분리가 되어
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(Primer)
4) DNA 중합효소
5) PCR의 이용
(2) 전기영동(Electrophoresis)
1) 전기영동의 원리
2) 전기영동의 매질
3) 전기영동의 기구
4) 전기영동의 다양성
5) 전기영동의 방법
6) 핵산의 검출
4. 실험방법
5. 실험기구 및 시약
6. 참고문헌
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ote인지, homozygote인지를 구별 할 수 있었다.
실험이 성공적으로 이루어져 깔끔한 상태의 결과를 확인할 수 있었고, 어떤 것이 자식 오염주인지 전기영동 결과를 통해 알 수 있었다. 한 개의 종자(4번)만이 대립되는 두 allele을 갖지 못하여, 1개의
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전기영동을 이용하여 단백질과 DNA의 크기를 측정하는 네 번째 실험에서 α-synuclein의 크기는 38.619kd, LDH의 크기는 22.039kd였고 DNA중 하나는 초나선구조, 하나는 선형구조를 갖는다.
먼저 단백질은 SDS-PAGE를 이용하여 크기를 구했는데 SDS는 계면
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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