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Solubilization : inclusion body에 urea나 guanidine HCL등을 넣어주어 hydrophobic interaction을 감소시켜 뭉쳐 있는 IB를 풀어주는 방법
Refolding: IB 를 Solubilization시켜주는데 사용한 denaturant의 농도를 감소시켰을 때 자가적으로 folding되는 방법
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단백질의 band를 gel 위에서 확인하는데 가장 정확하고 신속한 방법이다. 2D-PAGE의 경우는 추출액으로부터 다른 정제과정 없이 구조 해석용의 정제 단백질 회수가 가능하다.
4. 참고문헌(Reference)
TaKaRa, 『Refolding CA kit 실험강좌』,
네이버 지식백
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한다. 이온 교환 크로마토그래피(Ion exchange chromatography),
소수성 크로마토그래피(Hydrophobic interaction chromatography),
친화성 크로마토그래피(affinity chromatography),
biospecific affinity chromatography,
membrane chromatography,
purification of recombinant proteins
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단백질이 여기서 ATP를 소모하여 완전하게 접힘
- 새로 합성된 단백질뿐만 아니라, 세포 내에서 denature된 단백질도 refolding
(5) 단백질 합성의 종결 (Termination of protein synthesis)
1. stop codon을 만나면 종결
- stop codon: 대응되는 AA-tRNA가 없다
- nonsen
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단백질 X-10 (A virtual model protein consist of 124 amino acid with 2 disulphide bonds)을 생성하기 위한 공정이다.
Route 1는 fermentation과 primary recovery step, Intermediate recovery step, Refolding step으로 구성되어 있다.
2.1-A. Fermentation
일정양의 Glucose와 물을 mixing(P-1/V-10
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