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단백질에 대하여 친화성을 가지는 다양한 물질이 ligand로서 사용되고 있다. affinity chromatography로서 분리능력은 낮지만, ion-exchange법 및 gel filtration법과는 다른 분리 원리를 갖고 많은 단백질의 정제, 특히 정제 초기 단계에서 효과를 발휘한다.
I
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1. Date
31 March 2006
2. Subject
단백질 분리정제 및 기능분석: 개요 및 column chromatography 준비
3. Object
단백질을 분리정제 및 기능분석을 하기 위해 몰 농도와 Buffer 용액에 대한 개념을 익히고, column chromatography를 작동시키는 데에 필요한 Buffer 용액
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단백질의 분리조건을 최적화한다.
■GST fusion protein
glutathione-S-transferase의 약자로 목적으로하는 기질과 강하게 결합하는 성질때문에 발현시킬 단백질의 정제용으로 보통 fusion 시켜 이용한다. 1. 9R-1. Affinity chromatography, Ion chromatography, gel chr
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tting
Tag결합단백질(P177)
Reocombinant protein 정제: His-Tag
Protein Purification
EGFP and GFP
Blotting ?
Principles of Western blotting
RNA interference (RNAi) technology
His-Tag
SDS-Page
Southern blotting
Northern blotting
Western blotting
A. structure of siRNA, B. mechanism of RNA-
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정제과정을 거쳐야 원하는 단백질을 분리할 수 있다. 이 과정은 대단히 노력, 끈기, 자본을 요하는 것으로써 평생동안 한가지 단백질을 정제하는 과학자도 있음을 생각해야 한다. 여기에서는 정제되지 않은 전체 단백질(whole cellular protein)과
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