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subculture, normal cell과의 차이점, cell counting 등 기초 지식과 transfection의 원리, transformation과의 차이점, transfection의 효율 계산, MTT Assay를 통한 살아있는 cell의 숫자 측정법 등 전문 지식을 많이 알게 되었다. 의외인 것은 생각보다 간단한 원리로
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(1) MTT 시약을 이용하는 Tetrazolium assay는 노란색의 수용성 MTT tetrazolium을 세포에 처리하면, 살아있는(metabolism이 온전한) 세포의 미토콘드라이에 있는 탈수소효소에 의해 tetrazolium의 ring structure 끊어지면서 청자색을 띄는 비수용성 MTT formazan 결정
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시험범위
• P82: 세포증식곡선-증식곡선, MTT(MTS) assay
• P140: 유전자도입 -Transfection
• P125: GFP 가시화 기술을 이용하나 organelle의
동태관찰 (Reporter gene)
• 유전자발현억제-Antisense법(P182), RNAi(P186)
• 유전자발현분석
N
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assay는 세포의 condition이 비교적 정확하게 반영된다. 이것은 dehydrogenase, NAD, NADP 및 mitochondrial activity 등 여러가지 요소들의 영향을 받기 때문이다. 다른 tetrazolium salt에 비해 WST-1이 감도가 높고, 측정 범위가 넓은 장점을 가진다. 세포 증식능력
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MTT assay 시에 배지를 먼저 제거하는 과정이 있었는데 이때 cell이 같이 제거되었을 수도 있다. 하지만 이 요인이라면 전체 well에서 전혀 증식이 일어나지 않은 control의 흡광도보다 낮게 나오는 상황은 일어나지 않았을 것이다. 따라서 아마도 con
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Society for Biomaterials, March 27, 2009.
3. http://blog.naver.com/rezielf; MTT assay
4. http://bioscience.egloos.com;H&E staining, Hematoxylin and Eosin staining
5. E. M. Hwang's protocol Ⅰ. 서 론
Ⅱ. 연 구 목 적
Ⅲ. 실 험 방 법
Ⅳ. 연구 결과
V. 결론
ⅤI. 참고문헌
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