SDS-PAGE & Western Blot 결과 레포트

소개글

SDS-PAGE & Western Blot 결과 레포트에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험재료 및 방법
1) 실험재료
2) 실험기기 및 장비
3) 실험방법
4. 결과
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

Gel types에 따라 2D-electrophoresis using Rod gel와 Slab gel로 나뉜다. Rod gel은 2D-electrophoresis를 할 때 사용되는데, 단백질을 pI와 분자량에 따라 분리하는 방식이다. 1차원 전기 영동에서 단백질은 rod gel에서 pI에 따라 분리된 후 SDS polyacrylamide gel에서 2차원 전기 영동으로 분자량에 따라 분리된다. 다음으로, Non-dissociating buffer system와 Dissociating buffer system로 구분할 수 있다. Non-dissociating buffer system는 Native-PAGE, Dissociating buffer system은 SDS-PAGE를 사용한다. Native-PAGE는 SDS를 사용하지 않기 때문에 denaturing을 일으키지 않아 folding도 분리에 영향을 미친다는 점에서 오로지 크기로 분리하는 SDS-PAGE와는 차이가 있다. 따라서 Native-PAGE는 단백질 간의 binding을 분석하는 등 단백질 구조가 중요한 실험에서 사용한다. 또한, Continuous system와 Discontinuous system로 구분할 수 있다. Discontinuous system은 단백질이 같은 선상에 위치할 수 있도록 하는 Stacking gel이 있고 그 아래에 Running gel이 있다. pH가 다른 두 gel이 있다는 특징이 있고 Continuous system는 이와 다르게 하나의 gel이 존재한다. 한 종류의 gel이기 때문에 빠를 수 있지만 sample volume이 각각 달라서 완전히 동일선상에서 출발하지 않는다는 특징이 있다. 이 실험에서는 Slab gel, Dissociating buffer system, Discontinuous system을 이용하므로 SDS-discontinuous polyacrylamide gel electrophoresis를 진행한다.

키워드

생명과학,   단백질분석,   western blot,   SDS-PAGE,   전기영동법