단백질 정제 및 분석

소개글

단백질 정제 및 분석에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1.Introduction

2.Material and Methods

3.Result

4.discussion

본문내용

Bacillus subtilis가 starvation과 같은 환경적 스트레스를 받게 되면, cell growth나 symmetrical dividing이 멈추고 sporulation을 시작하게 된다. 그러나 B. subtilis는 많은 organism이 가지고 있는 check point mechanism에 의해 DNA Damage나 replication의 결함이 있을 시에 sporulation을 shut down한다.
B. subtilis의 sporultion control은 Spo0A, 0B, 0E, 0F, 0H, 0J, 0K, 0L 의 8개 control factor에 의해 이루어진다. 여기서 Spo0A가 most critcal factor인데, sporultion control의 main player가 된다. 다음은 간략한 sporulation initiation control의 model이다.
autophosphorylate Histidine Kinase(KinA, KinB, KinC)가 SpoOF에 phosphatef를 transfer하면, Spo0B를 거쳐 결국 Spo0A에 전해지는데 Spo0A는 regulator(site-specific DNA binding protein)로서 이러한 multicomponent phosphorelay에 의한 phosphorylation으로 activation되어 sporulation-specific gene을 발현한다.
이러한 Spo0A의 activation signaling pathway에는 replication initiation필요한 3개의 유전자 (dnaA, dnaB, dnaD )가 있다. 여기서 B. subtilis의 DnaA는 E. coli DnaA 처럼 어떤 gene을 negatively regulate 하는데, 최근에 실험을 통해 DnaA가 overexpession 되면 sda(suppressor of dnaA) 의 발현 양이 증가하여 Histidine Kinase KinA의 inhibitor로 작용한다는 것이 밝혀 졌다. 이외에도 sda는 이 signaling pathway에 관여하는 부분이 많다고 예상되어 진다.

키워드

단백질,   정제,   PAGE,   크로마토그래피,   전기영동