DNA 추출 및 PCR & PCR 결과 확인(전기영동),DNA의 구조

소개글

DNA 추출 및 PCR & PCR 결과 확인(전기영동),DNA의 구조 에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험 목적(Purpose of experiment)
2. 배경지식(Background knowledge)
3. 가설 설정(Setting up hypothesis)
4. 실험(Experiment)
5. 결 과(Result)
6. 고찰(Discussion)


[별첨] 재료 준비 및 실험 과정

본문내용

amp의 전원을 끄고, 관찰한 gel은 바로 polyglove에 싸서 버린다.
5. 결 과(Result)
PCR 결과 확인(전기영동)
2. 좌 - PCR Product의 결과, 우 - DNA 추출액의 결과
PCR Product는 대조군을 제외하고는 어떠한 반응도 일어나지 않았고, DNA 추출액의 경우 3개 조에서 반응이 일어났다..
6. 고찰(Discussion)
이번 실험은 2주차에 걸쳐 실행된 실험이었다. 첫 주차에는 쥐 근육에서 DNA 추출액과 PCR product를 만들었다. 두 번째 주차에는 gel을 만들고 전기영동 과정을 거친 후에 관찰하였다.
PCR의 경우, 대조군만 결과가 관찰되었다. 이는 전기영동을 하는 과정은 문제가 없었고 PCR Product를 만드는 과정에서 문제가 발생되었음을 의미한다. 발생한 문제의 원인을 2가지로 생각할 수 있다.
첫 번째는 PCR Product를 만드는 과정에서 용액의 양이 잘못 투입된 경우이다.
두 번째는 쥐 근육을 잘게 분해해야 하는데, 덜 분해된 조각으로 실험을 하여 DNA 조각이 너무 큰 경우이다. DNA 조각이 너무 클 경우, 전기영동 과정에서 문제가 발생한다. 너무 큰 상태로 DNA가 복제가 되었기 때문에 복제된 DNA가 전기영동 과정에서 gel을 통과하지 못해 아무것도 나타나지 않을 수 있다.
DNA 추출액은 상대적으로 잘 관찰되었다. 하지만 DNA 추출액 역시 뚜렷하게 나오지 않고 흐릿하게 나왔다. 이런 이유는 아까 PCR에서 들었던 요인과 같다.
DNA 추출 과정에서 56℃ water bath에서 20분간 incubation을 하는 이유는 효소 활성화 온도를 맞추기 위해서이다.
사용된 gel에는 TAE buffer 완충용액을 사용하였다. 이 용액은 Tris, Acetate, EDTA 세가지 용액이 혼합되어있다. Tris 용액은 양이온을 공급하는 역할을 한다. DNA는 -성질을 띄기 때문에 양이온을 넣어, DNA를 음극에서 양극으로 끌려가도록 한다. Acetate 용액은 Tris 용액의 PH가 11에 가깝기 때문에, 이를 낮추기 위해 투입된다. 마지막으로 EDTA 용액은 금속이온을 용탈시켜 효소의 작용의 반응을 억제한다.
7. 인용문헌(Literature cited)
네이버 지식백과. DNA의 기능, http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=925635&cid=3430&categoryId=3430
네이버 지식백과. DNA의 구조 http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1185313&cid=40942&categoryId=32326
네이버 지식백과. DNA의 복제. http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1185314&cid=40942&categoryId=32326
네이버 지식백과. 유전형질발현. http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=164671&cid=577&categoryId=577
네이버 지식백과. PCR.. http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=296731&cid=577&categoryId=577
네이버 지식백과. PCR법, http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1224151&cid=40942&categoryId=32326
네이버 지식백과. 전기영동, http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1048185&cid=128&categoryId=128
[별첨] 재료 준비 및 실험 과정
1. 실험재료 준비
2. 실험 과정(쥐 근육 DNA 추출 과정)
3. 실험 과정(전기영동)
4. 결과 관찰

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