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다. 이 과정 역시 세게 흔들면 안 되는데 chromosomal DNA가 나오게 되면 앞으로의 과정에서 플라스미드와 따로 분리해 낼 방법이 없기 때문이다. buffer3를 넣어 pH를 7로 복구가 되면 크기가 작고 supercoiled form을 유지하고 있던 플라스미드는 비교적
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PCR을 통한 Gene cloning을 배웠다.
Gene cloning으로 DNA을 자르고 붙이고 변형시켜서 실험에 필요한 재조합 recombinant DNA을 제조하는데 중심을 둔 실험이었다. 재조합 DNA를 삽입하는 과정을 배우는 도중에 Plasmid의 복제를 하므로써 재조합 DNA가 하는
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1. title: 배지에 세포 배양.
2. materials: micro pipette, tip, 배양 될 세포, agarose gel, 알코올 램프, 유리막대.
3. purpose: agarose gel에 PCR을 위한 세포를 배양 할 수 있다.
4. Method
1) agarose gel에 배양 될 세포를 micro pipette을 이용 하여 원하는 양을 딴다.
2)
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PCR)
* PCR에서 필요한 재료
* PCR 의 원리
① DNA의 변성(denaturation)
② Primer의 결합(annealing)
③ DNA의 합성(polymerization)
4) PCR의 산물의 전기영동(electrophoresis)
PCR product purification
Ⅱ. 얻은 유전자를 vector에 삽입
1) Vector
※ Vector의 기능
※
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1.Title: 세포 내 DNA colony PCR
2.materials: 2㎕ PCR buffer, 0.4㎕ dNTP(0.1㎕ each of dATP dCTP dTTP dGTP), 0.2㎕ primer (10㎕ each of primer, 0.1㎕ Taq polymerase, 16.3㎕ DW, 1㎕ template DNA, micro pipette, tip, micro tube, colony lysis buffer, 배지에 배양된 세포 1.Title:
2.materials:
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PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Disc
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