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효소의 specific activity (U/mgenzyme )를 계산한다.
※ 실험 시 유의사항
- pNPB는 광분해될 수 있으므로 호일로 감싸야 한다.
- 흡광도 측정할 때 UV-Vis spectrophotometer에 외부 빛이 들어가지 않도록 한다.
- Sampling할 때 정확한 흡광도 측정을 위해 cuvette
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효소의 specific activity (U/mgenzyme )를 계산한다.
※ 실험 시 유의사항
- p-NPB는 광분해될 수 있으므로 호일로 감싸야 한다.
- 흡광도 측정할 때 UV-Vis spectrophotometer에 외부 빛이 들어가지 않도록 한다.
- Sampling할 때 정확한 흡광도 측정을 위해 cuvette
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isolation(Ammonium acetate 법
2. DNA Restriction (Vector 제작
3. pS44 DNA restriction
4. Electrophoresis
5. PCR (polymerase chain reaction
6. Elution ;Gene clean kitⅢ(Bio101
7. Ligation
8. Competent cell 제조 (DH5α) - CaCl2 법 사용
9. Transformation (Heat shock
10. screen
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PCR product는 selection plate 에 spread된 transformation culture에 존재하는 미량의 insert DNA에 의한 것이라 할 수 있다.
PCR시 product가 형성되는 결과를 나타낼수 있는 최소의 양을 확인하기 위해 template인 pf7 DNA를 4000, 400, 40, 4, 0.4pg으로 희석한 다음 Npf7과 C
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Restriction enzyme
※ Recombinant DNA
※ 제한효소 (restriction enzyme)
3) DNA ligation과 T-vector를 이용한 PCR product의 cloning
Ⅲ. 유전자가 삽입된 DNA를 세포 내로 주입
1) Transformation
2) 항생제와 LacZ를 이용한 seletion
※ 항생제를 이용한 selection
LacZ를
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전하를 막아 DNA가 세포막을 통과할 수 있게 된다. 따라서 칼슘이온을 처리해 genetic competence를 갖게 한 E.coli를 competent cell 이라 한다. Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일// 왓슨의 분자생물학 6판//p748
따라서 이번 실험을 통해서 연
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1789, 프랑스 대혁명 1부·2부’영상물, 히스토리 채널. 논문요약
1. 서 론
2. 프랑스 혁명의 배경과 원인
3. 프랑스 혁명의 과정과 전개
4. 프랑스 혁명의 결과 및 한계
5. 프랑스 혁명에 대한 상반된 견해
6. 결 론
참고문헌
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