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웨스턴 블롯팅.
쥐의 갑상선 수양암(medullary carcinoma)세포주인 CA77 세포와 자궁경부암(cervix carcinoma)세포주인 HeLa 세포의 핵추출물을 50㎍씩 10% SDS-폴리아크릴아미드 겔에서 전기영동한 후 nylon 흡착지에 전기이동하였다. 분자량 표지자는 biotin으
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웨스턴 블랏
)
유전자 치료란?
레트로바이러스를 이용한 유전자치료
마이크로 어레이
마치며 1. 탐구동기
2. 플라스미드란?
- 벡터(Vector)란?
- 왜 플라스미드를 벡터로 가장 많이 사용하는가?
3. 클로닝이란?
- 전기영동실험
-
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성 생성물을 얻는 것이다.
효소의 항체 결합 방법
효소는 1차 항체에 직접 결합하거나 또는 간접적으로 2차 항체에 연결될 수 있다. 직접적인 방법은 항체를 형광 색소 혹은 peroxidase나 alkaline phosphatase 같은 효소와 결합시켜서 직접 조직에 있
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ye를 2ul 넣어야 하는데 total volume이 12ul이 넘어버리므로 18ul로 해준다.
4. comb을 넣을 때는 거품이 생기지 않게 기울여서 넣는다.
5. 파란색 dye가 밑에 올때까지 전기영동 하는데 너무 끝에까지 닿지는 않게 한다. 단백질이 빠져버리기 때문이다.
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전기영동 실험 방법
(1) 장비
(2) supporting medium의 특징, 선택 및 조제
1) paper
2) Cellulose Acetate
3) Thin layer electrophoresis(t.l.e.)
4) block electrophoresis
5) gel
① 전분
② 한천
③ Polyacrylamide
(3) 실험 순서
1) Medium saturation
2) samp
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ote인지, homozygote인지를 구별 할 수 있었다.
실험이 성공적으로 이루어져 깔끔한 상태의 결과를 확인할 수 있었고, 어떤 것이 자식 오염주인지 전기영동 결과를 통해 알 수 있었다. 한 개의 종자(4번)만이 대립되는 두 allele을 갖지 못하여, 1개의
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전기영동을 이용하여 단백질과 DNA의 크기를 측정하는 네 번째 실험에서 α-synuclein의 크기는 38.619kd, LDH의 크기는 22.039kd였고 DNA중 하나는 초나선구조, 하나는 선형구조를 갖는다.
먼저 단백질은 SDS-PAGE를 이용하여 크기를 구했는데 SDS는 계면
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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