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western blotting을 수행할 때 왜 SDS-PAGE를 사용하는 것일까? 기본원리는 cell extracts로부터 특정 protein을 detection하기 위해서 먼저 gel electrophoresis를 이용하여 size 별로 분리해 낸다. 이 과정에서 protein을 순수하게 size별로 분리해내기 위해서, protein을
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참고 문헌
- 연세대학교 의과대학 분자생물학 실험실
- 단백질실험노트, 월드사이언스,2001.9.1, 김승호 외 공역 1. SDS-PAGE(Sodium dodecylsulfate polyacrylamide)
◆ 단백질 분리
◆ SDS-PAGE의 원리
◆ 단백질의 염색
2. Western Blotting
3. 참고 문헌
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luminol은 빛 에너지를 방출하면서 바닥 상태로 떨어진다. 단백질 immunoblotting에서 발생된 빛은 고정된 항원에 도달하고 이것이 사진으로 검출된다. 이 방법의 western blotting은 standard colorimetric assay방법보다 10배 이상의 감도를 보인다.
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western blotting에서 발생된 빛은 고정된 항원에 도달하고 이것이 사진으로 검출되는 것이다.
※ 1차 항체의 affinity와 specificity가 좋다면 1차 항체에 직접 peroxidase나 alkaline phosphatase 등의 효소를 직접 cross-link하여 사용해 볼 수도 있을 것이다.
5. Ref
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1. Date
28 April 2006
2. Subject
정제된 단백질의 SDS-PAGE 분석
3. Object
정제된 단백질의 SDS-PAGE를 분석하기 위한 방법인 western blotting에 대한 지식을 익힌다. 단백질을 membrane으로 전사하기 위한 kit제작 방법을 배운 다음 gel transfer를 하여, 단
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