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1. 날짜 : 2012. 04. 30
2. 제목 : Enzyme activity에 대한 온도의 영향
3. 실험 목적 : Lipase의 활성에 대한 온도의 영향을 알아본다.
4. 재료
시약 – 0.1 M sodium phosphate buffer solution, 10 mM p-nitrophenol butyrate, 6.2 mg/mL lipase solution
기구 –
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ㄴㄴ
이다.
7. 고찰(Discussion)
- 위 실험에서는 온도에 따른 Lipase의 변성과 함께 Activity의 차이에 대해 실험하였다. 예상했던 결과로 Lipase의 구성은 단백질로 이루어져 있고, Lipase는 60℃, 30분간 변성이 일어났다. 그 결과 Activity의 차이에서는 약
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Lipase가 substrate와 반응하고 있다고 볼 수 없으며, 다른 분자와 반응하거나 결합 할 수 도 있기 때문에, 온도에 따라 O.D값의 차이가 있을 수 있다.
8. 참고문헌(Reference)
- Lehninger Principles of biochemistry, David L.Nelson/Michael M. Cox, 월드 사이언스, 2014, 80
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넓어야한다. 이를 보완하기위해서 incubator에서 눕혀서 반응시켰지만 충분치 않았다고 생각되어, 우리가 반응시킨 25°C보다 조금 더 높은온도에서 반응시켜 용액내 분자들의 activity가 높아저 더 정확한 결과가 나오지 않았을까 생각된다.
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tion(pH 7.8, 30 C, 90 min)
free F.A.를 petroleum ether 로 extract 하여 NaOH로 titration. (thymolphthalein)----> fatty acids 양과 lipase activity가 비례.
b) Turbidimetric method
Olie oil의 emulsion이 lipase에 의해 clearing되는 정도를 340nm에서 spectrophotometer로 측정. Absorbance의 감소
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