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Agarose-gel 전기영동
실험목적
종류가 다른 DNA 단편을 agarose-gel 전기영동을 통해서 크기를 분석하고, agarose-gel 전기영동 장치의 사용법을 알아본다.
이론 소개
≪ 사 진 ≫
DNA의 정의
≪ 그 림 ≫
DNA의
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DNA를 대조구로써 함께 전기 이동한 후 겔의 사진을 찍고 band의 밀도를 densitometer로 읽는다. 대조구 DNA의 농도와 측정된 밀도 사이의 표준곡선을, 그리고 샘플 band의 밀도에 해당되는 DNA 농도를 내삽(intapolation)으로 얻기도 한다. (Plasmid DNA 분
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agarose
- Agarose Gel은 젤화 경향이 센 다당류의 하나로 생체 물질을 분리하는 여과제로 사용된다.
⑧ DNA ladder (= Size marker)
⑨ DNA loading star (6X)
Fig 13. DNA ladder
- 샘플의 크기를 알기 위한 기준으로 사용되는 시약으로, 첫번째 홈에 로딩하여 측정
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agarose
- Agarose Gel은 젤화 경향이 센 다당류의 하나로 생체 물질을
분리하는 여과제로 사용된다.
⑧ 1 kdp DNA ladder
(= Size marker)
⑨ DNA loading star (6X)
Fig 15. DNA ladder
- 샘플의 크기를 알기 위한 기준으로 사용되는 시약으로, 첫번째 홈에 로딩하여
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DNA 중 한쪽 가닥이 끊겨 있는 상태이다.
② Supercoiled plasmid DNA (닫힌 원형 또는 초나선)
- 이중가닥 plasmid DNA가 끊기지 않고 초나선으로 꼬여져 뭉쳐있는 상태이고, 미생물로부터 분리된 plasmid DNA는 대부분 전기영동 후 Agarose gel 상에서 이 형태
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agarose gel은 polyacryamide보다 큰 통로를 가지고 있어 분자량이 큰 DNA를 분리하는데 적합하기 때문에 DNA 크기 측정에 이용된다. DNA 전기영동도 단백질의 전기영동과 마찬가지로 큰DNA가 작은 DNA보다 멀리 이동하지 못한다. 하지만 DNA의 경우 같은
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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샘플들의 순도는 80%임을 알 수 있었고, 멜론 종자의 순도검정시 DNA mar
ker를 이용하여 검정할 수 있다는 결론도 얻었다.
5. References
- 농림수산식품부(2008) 수박ㆍ멜론의 품종 지문화 연구 및 순도검정 마커 개발. 연구보고서 3-84
- 이계동(2003) 수
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?
[다수를 잘 따르는, 그리고 잘 이끄는 녀석]
2. 자신이 가장 성취감 있게 완수한 일은 무엇입니까?
[제24대 총학생회 부회장]
3. 위니아만도에 해당 직무로 지원하게 된 동기는 무엇입니까?
[남다른 위니아만도 DNA를 물려받다]
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합니다. 체계적인 계획 수립을 통해 결과를 얻기까지의 경험을 통해 성공 DNA를 함양할 수 있었다고 생각하며, 그런 경험이 OOO 직무를 수행함에 있어서 긍정적인 영향을 끼칠 것이라고 생각합니다. 1. 이직사유(1~10)
2. 사회경험(1~10)
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. 체계적인 계획 수립을 통해 결과를 얻기까지의 경험을 통해 성공 DNA를 함양할 수 있었다고 생각하며, 그런 경험이 OOO 직무를 수행함에 있어서 긍정적인 영향을 끼칠 것이라고 생각합니다. 1. 핵심역량(1~10)
2. 사회경험(직무경험) (1~10)
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계획 수립을 통해 결과를 얻기까지의 경험을 통해 성공 DNA를 함양할 수 있었다고 생각하며, 그런 경험이 OOO 직무를 수행함에 있어서 긍정적인 영향을 끼칠 것이라고 생각합니다. 1. 성격의장단점(1~10)
2. 핵심역량 (1~10)
3. 사회경험 (1~10)
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계획 수립을 통해 결과를 얻기까지의 경험을 통해 성공 DNA를 함양할 수 있었다고 생각하며, 그런 경험이 OOO 직무를 수행함에 있어서 긍정적인 영향을 끼칠 것이라고 생각합니다. 1. 성장과정
2. 성격의장단점
3. 사회경험(직무경험)
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