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DNA와 linear DNA
대부분의 plasmid는 세포내에서 supercoiled circular DNA로 존재하며 이러한 supercoiling은 plasmid replication 과정 중에 topoisomerase에 의해 수행되어진다. plasmid DNA 가닥에 손상된 곳이 없을 때 covalently closed-circular(CCC) DNA를 형성하며 반대로 두
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효소들의 종류
(1) Nuclease
(2) ligase
(3) polymerase
(4) modifying enzyme
(5) topoisomerase
3) 제한효소의 종류와 절단부위
4) 제한효소를 이용한 DNA의 절단시 고려할 사항들
5) 대표적인 DNA절단 제한효소와 절단 인식자리
6) 전기영동(electrophoresis)
(1) 전기영동
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제한효소는 l형 보다도 분자량이 훨씬 적고, 반응에는 Mg++를 필요로 한다. 이 효소는 DNA가닥의 4~8 염기를 인식하여 염기배열내 또는 주변의 일정 분위의 DNA 가닥을 절단 한다.
ll형 제한효소의 하나인 EcoR1은 위의 6염기를 인식하고, 화살표표시
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1. 주제
2. 실험목적
3. 실험원리(서론)
■ 제한효소
1) Type I restriction enzyme
2) Type II restriction enzyme
3) Type III restriction enzyme
■ 제한효소를 이용한 DNA의 절단
■ 전기영동 ( electrophoresis )
■ DNA 정량
(1) DNA의 농도측정 원리
(2)
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DNA가 Nicked , Linear, Covalently Bonded, Supercoiled, Circular single stranded 등 다양한 형태로 존재 할 수 있다. 하지만 uncut plasmid에서 Linear의 형태로만 존재할 수도 있기 때문에 제한효소 처리 후에도 절단되지 않았지만 전기영동 사진에서는 Linear의 형태로
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DNA라도 초나선구조는 표면적이 작기 때문에 전기영동에서 빨리 이동하고 선형구조는 초나선에 비해 표면적이 크므로 늦게 이동하기 때문이다. 본 실험에서는 똑같은 플라스미드 DNA에 제한효소를 처리 한것과 하지 않을 것을 사용하였으므로
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DNA Marker 개발. 한경대 산업대학원
- 박효근(1984)동위효소 분석법에 의한 무우 종자의 순도 검정. 서울대학교 1-27
- 이지은, 김성길(2009) DNA marker를 이용한 멜론의 일대잡종품종 순도검정. 1-5
- 김두환 DNA marker를 이용한 F₁순도 검정. 한국원예학
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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DNA염기쌍의 상보적 결합, 그 결합의 종류
♦ 반응속도에서 온도의 영향
♦ 유전자와 유전체의 차이, 액화천연가스(LPG)의 구성성분
♦ 화학반응은 첫 번째로 어떤 것이 일어나는가?
♦ 플라스틱pet의 full name은 무엇인가?
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