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Enzyme
6) Reaction temperature PCR & 제한효소처리
PCR
PCR의 원리
PCR의 반응조건
PCR의 과정
PCR 반응시의 문제점
PCR 반응시의 문제점
제한효소(Restriction Enzyme)
제한효소의 종류
제한효소 Type Ⅱ
제한효소가 자신을 자르지 않는 이유
제한
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처리도중이나 영동중에 물리적으로 잘라 버린다. PEGE에서는 용균, DNA 유출 ,제한효소에 의한 절단등의 반응을 모두 한전 블록 속에 봉입한 상태로 한다. 그리고 전기영동은 전하의 방향을 변화시킨다. 이 조작에 따라서 DNA 사슬이 한천 겔의
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enzyme mapping
분리한 DNA를 제한효소로 처리하여 원하는 DNA가 삽입되어 있는지를 확인한다.
실험에서 사용한 DNA의 염기서열을 알고 있기 때문에 제한효소를 처리하면 우리가 원하는 DNA가 맞는지를 확인이 가능하다.
제한효소처리 후 한쪽 끝에
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합 DNA가 실제로 들어간 박테리아만을 선별함.
4. DNA 문고(DNA library)
어떤 생명체의 모든 DNA(genome 전부)를 적당한 크기로 잘라서 클로닝을 위하여 보관한 것.
① DNA 추출 --> 제한효소 처리 --> DNA 조각을 박테리아 플라스미드에 삽입 --> 선
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제한효소 처리 후에도 절단되지 않았지만 전기영동 사진에서는 Linear의 형태로 나올 수 있기 때문이다.
실험에 대한 기타 보충설명
① 제한효소를 사용할 때 하나만 사용하면 잘라진 부위가 다시 붙을 가능성이 높다. 따라서 되도록 두 종류의
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