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DNA제조
DNA 3㎕
10×buffer 1㎕
PstI 0.3㎕
dH2O 5.7㎕
Total10㎕
※5시간 동안 반응 후 냉장고 보관 ● 실험방법
1. Microfuge tube에 E.coli culture를 1.5mL(tube가 넘치지 않을 만큼)채운다. 그 후, maximum speed로 centrifuge를 30초가량 시행한다. 우리 조의 경우 15000
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박테리아 배양과 수확
세포가 피괴되면서 내용물 유리
DNA를 제외한 모든 성분 제거위해 세포추출물 처리
DNA 용액농축 세포전체 DNA
세포 전체 DNA의 준비
플라즈미드 DNA
플라즈미드 DNA정제
파아지 DNA
박테리오파아지 DNA제법
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Ligation - DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다.
Ligase - Ligation 에 이용되는 효소
DNA를 기질로 사용하는 ligase를 DNA ligase, 라 한다.
- T4, E. coli ligase
RNA를 기질로 사용하는 ligase를 RNA ligase라 한다.
RNA ligase는 single strand의 DNA 또
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이 있는데, 현재 많이 사용되는 ligase는 T4 DNA ligase와 E. coli DNA ligase이다. T4 DNA ligase는 cofactor로 ATP를 필요로 하고, E. coli ligase는 NAD+를 필요로 한다. 이들 두 ligase는 blunt-ended DNA, cohesive-ended DNA, nicked DNA등에 모두 작용할 수 있으나 E. coli DNA ligase
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Enzyme으로 절단된 vector의 경우 self-ligation 으로 인하여 외래 DNA가 삽입되는 효율이 매우 낮다. 이 경우 어떻게 하면 외래DNA를 쉽게 삽입시킬 수 있을 지 의견을 제시해 보라.
: 양 말단이 동일한 제한효소 부위를 가지는 DNA경우 vector의 양말단도
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제조 및 DNA 분리특성」, 한국식 품과학회지 Vol.31, No.1, 도정룡, 오세육저, 한국식품과학회, 1999, p110-114.
-http://kin.naver.com/db/detail.php?d1id=11&dir_id=110205&eid=hRLCh+1aFbi3Sk8wm 5HOWnbPLZGgytYq&qb=RE5BwMcgwaS3riDD+MGk
-http://blog.naver.com/reframan?Redirect=Log&logNo=40029466494
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6.2 단백질(Proteins) ------------------------------- 34
6.3 핵 산 --------------------------------------- 39
Ⅲ. Chitosan을 혼입한 spange제조 실험 ------------------ 45
Ⅳ. 결 론 ------------------------------------------47
Ⅴ. 참고 문헌 -------------------------------------49
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DNA와 일치하므로 해당 연구 결과를 인간에게 적용시킬 여지가 높아진다. 앞으로 줄기세포를 이용하여 근육분화에 대한 연구가 활발해 지리라 예상이 된다. 그리하여 기존에 정복하지 못했던 근육관련 질병들을 머지 않아 극복해 낼 수 있을
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