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plasmid DNA를 전기영동하고, UV를 비춰 찍은 사진이다. 중간에 선명하게 하나의 band로 나타난 것은 대조군으로 쓰기위한 standard marker이고, 주변의 분명치 않은 부분은 보는 바와 같이 어떠한 이유에서인지는 모르겠지만 전기영동이 전혀 이루어
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플라스미드
-플라스미드 분리
-원심분리기
원심분리기는
-아가로스
3. 실험준비물
1)소모성 재료
2)기기
4. 실험방법
1)Plasmid mini prep kit을 이용한 정제
2)아가로스 젤 만들기
3)전기영동
3)DNA 확인
5. 실험결과
6. 고
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플라스미드 DNA이며 분리방법은 기본적으로 total cell DNA분리와 같지만 어느 단계에서는 염색체 DNA와 분리되어야 한다.
2-1. 플라스미드 DNA의 분리
3. 제 3 타입은 파지 DNA이 며 파지 클로닝 벡터로 이용될 때 필요.
3-1. 박테리어파지 DNA의 분리
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dry시킨다.
ⅹ) Pellet을 TE(pH 8.0) with RNase(final 20μg/ml) 50μl에 녹인 후 37℃에서 30분간 incubation한 후 -20℃에 보관한다.
☞ 분리된 DNA의 정량
ⅰ) UV spectrophotometer를 10분 정도 미리 켜두어 발생되는 자외선을 안정화 시킨다.
ⅱ) 실험에서 얻은 DNA 용
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r 4 (10x)
2㎕
Mini-prep한 plasmid
10㎕
D.W
7㎕
Nde I
0.5㎕
Nco I
0.5㎕
2.1% agarose gel에서 전기영동하여 mini-prep한 plasmid의 size가 정확한지 확인한다.
(이 때, loading dye가 들어있지 않기 때문에, 반드시 DNA loading dye(6x)를 첨가한 후에, gel에 loading한다.)
※실험
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