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r 4 (10x)
2㎕
Mini-prep한 plasmid
10㎕
D.W
7㎕
Nde I
0.5㎕
Nco I
0.5㎕
2.1% agarose gel에서 전기영동하여 mini-prep한 plasmid의 size가 정확한지 확인한다.
(이 때, loading dye가 들어있지 않기 때문에, 반드시 DNA loading dye(6x)를 첨가한 후에, gel에 loading한다.)
※실험
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1. 실험목적 : Plasmid의 정제과정을 배우고 직접 실험을 통해 학습 하기 위해서 실험을 진행한다.
2. 실험장비 및 시약 : Micro tube, Sol.1, Sol.2, Sol.3용액, Rack, Pipet, Centrifuge, Washing용액, Ilution buffer ,Column, Control용액,Cath2용액, DF8용액
3. 실험 방법
(
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Plasmid DNA 분리와 전기영동
<그림4. 전기영동 결과>
전기영동 결과 4kb DNA가 검출되었다.
Ⅳ. 논의
플라스미드 DNA는 박테리아와 일부 균에 존재하는 염색체 이외의 DNA 로 ‘작고 스스로 복제하는 두 가닥의 환형의 DNA’라 정의할 수 있다. 플
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kit의 특징Rapid ligation solution을 가지고 있어서 보통 ligation하는데 16시간 정도 걸리지만 이것을 이용할 경우 1시간에서 3시간이면 반응이 끝나서 시간을 절약할 수 있어서 편하다.
plasmid 를 추출하는 일반적인 방법
기본원리 세포내에 DNA는 일반
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kit의 특징Rapid ligation solution을 가지고 있어서 보통 ligation하는데 16시간 정도 걸리지만 이것을 이용할 경우 1시간에서 3시간이면 반응이 끝나서 시간을 절약할 수 있어서 편하다.
plasmid 를 추출하는 일반적인 방법
기본원리 세포내에 DNA는 일반
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