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유해성에 대해 항상 숙지하고 조심스럽게 다룬다. 1. Northern Blot의 원리
2. Northern Blot Protocol
1) Gel 만드는 법
2) 전기 영동(Agarose)
3) Northern Blot (Capillary transfer)
4) Prehybridization/ Hybridization
3. 동위 원소 실험실 내에서의 안전 수칙
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방법으로 특정 RNA가 세포 안 또는 조직 안에서 transcription(전사)되는 지의 여부와 전사되는 상대적인 양과 안정도를 정량화할 수 있다.
Northern Blot에서 좋은 결과를 얻기 위해서는 가장 조심해야 할 것이 RNase의 오염을 방지하는 것이다. RNase는
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CREB(대장균 CREB)
동일한 위치(약 43kd)에서 띠 관찰
양 세포에서 상당히 많은량의 CREB 발현 의미
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blotting
Western blotting(Immunoblottting)은 specific antiody를 이용하여 단백질 혼합물 중에서 원하는 단백질(antigen)만을 찾아내는 방법이다. 실험 방법으로 DNA에서 Southern blotting, RNA에서 Northern blotting과 같이 protein을 전기영동으로 분리시켜 놓고 이를 Nitr
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방법과 같다. 이 방법은 Northern blot hybridization과 같은 방법을 통해 가능하던 RNA 분석보다 실험방법이 더욱 간단할 뿐 아니라 유전자의 염기서열 결정이 가능하기 때문에 주로 mRNA의 염기서열 및 전사량을 연구할 때 크게 도움이 된다. 염기서열
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방법을 발명 한다면 ligation 되지 않은 product를 cloning까지 해볼 필요가 없어지므로 시간을 단축 할 수 있다.
또, cloning 할 때, 가장 중요한 것은 conformation이다. conformation이란 숙주 생물체가 외부로부터 DNA를 취하는 과정이다. 대장균은 그렇지
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