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실험 목적
Plasmid DNA의 구조적 특징을 이해하고 이를 이용하여 Plasmid DNA를 Purification한다.
DNA Purification 한 것을 전기 영동을 통해서 DNA를 크기 별로 분리하여 확인한다.
Plasmid DNA
Bacteria내에서 Chromosomal DNA와는 별도로 발견되는 작은 DNA, Ch
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plasmid 를 추출하는 일반적인 방법
기본원리 세포내에 DNA는 일반적인 double-helix를 형태를 가지는 반면 plasmid는 supercoiled형태를 가짐으로써 PH의 변화에 따라서도 plasmid의 형태 와 구조가 크게 변하지 않는 것을 이용하여 순수한 plasmid만을 추출
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ice, Principles of Life, Sinauer Associated, Inc & W.H. Freeman and Company, 2012, p.231-235, 244-262
2) Birnboim, H.C. and Doly, J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic Acids Research 7, 1979, p.1513-1523
3) Joseph Sambrook, David W. Russell, Molecula
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plasmid DNA 를 전기 영동하게 되면 오른쪽 사진과
같은 결과를 얻게 된다.
분리가 아주 잘 되면 supercoiled DNA (초나선 DNA)만 관찰되지만 분리과정에서 충격을 받게 되는 경우 open circular
(열린 원형) 형태가 생기기도 한다.
보통 plasmid DNA는 초나선
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plasmid란 무엇인가?
2. 분자유전학적 관점에서의 plasmid의 용도와 그 기능을 간략히 서술하시오.
3. Plasmid 구조(형태)에 대해 서술하시오. (그림포함)
4. 자신의 DNA gel 사진을 첨부하시오.
5. Gel 사진을 보고 Uncut DNA, Vector, Insert DNA size를 계산하
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