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목적
3.실험 기구및 시약
4.실험 이론
1)유전자 조작 원리
2)vector
3)vector의 종류
4)plasmid
5)λphage
(1) competent cell이란?
(2) competent cell을 만드는 방법
7) Transformation
8) 형질 전환된 세포의 선택
9) Transfection 과 Transformation
5. 실험방법
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클로닝이 중요한 이유
-시대적관점 및 현대적관점
2.유전자 클로닝이 무엇인가?
-정의 및 실험단계
3.유전자 클로닝을 하기 위한 실험도구들
-플라스미드, 바이러스, 벡터
4.유전자 클로닝의 중요성 강조
5.PCR에 대해서
6.유전자 클
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Cloning의 과정
Chymosin의 정의
Chymosin의 반응기작
Target DNA의 염기서열 파악
Vector 선택 및 Primer 제작
제한효소(Restriction Enzyme)를 이용한 절단
Target DNA와 Vector의 연결
숙주세포<E.coli >로의 도입 Part 1. 유전자 클로닝(Gene Cloning)
Part 2. 응
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galactosidase activity를 띄지 않는다. Lac selection을 통해 (-galactosidase의 유무(non-recombinant는 푸른 colony를 생성한다.)를 알 수 있다.
6. Cloning Vectors for E. coli
여러 cloning vector가 있지만 지난 50년 동안 연구되어 온 E. coli가 purification이 쉽고 high transformants
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vector와 foreign DNA이 연결시 두 개의 nick을 갖는 open circular form이 형성되는데 이는 host로 transformation된 후 repair system에 의해 수선되어 완전한 원형을 이루게 된다. 4R-1. Cloning vector로서 pBR322와 pUC18 DNA를 이용하였을 경우 재조합 DNA의 선별방법
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vector는 multiple cloning site에 LacZ gene이 존재한다. E. coli의 원래 genome에는 lac operon이 있다. operon의 operator에 repressor가 붙어 있어서 operator 앞부분의 promoter에 transcription factor가 작용하지 못하게 된다. 하지만 배지에 IPTG를 넣어주면, operator에 붙은 re
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pET 23c vector
http://www.merckbiosciences.com/docs/docs/PROT/TB051.pdf
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