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1. title: colony에서 추출한 DNA의 electrophoresis
2.materials: PCR된 MASTER MIX, 전기영동 기기, 전원공급장치, 50 x TAE 용액, 팁(tip), 마이크로피펫(micropipette), loading dye, DNA, size maker, agarose gel
3.purpose: PCR된 DNA template를 전기영동을 통해 PCR의 결과를 확인 할
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DNA 농도 일 때, double strand 보다 Single strand 일 때 빛의 간섭이 적어지므로 더 많은 빛을 흡수, OD값이 더 크다. Hyperchromic effect 으로 260nm에서 관찰한 값과 280nm에서 관찰한 값을 나누어서 나오는 값이 1.7에 가까울 수록, 순수한 DNA가 추출된 것이며
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다른 부분이 적기 때문이다. 실제로 판매하는 DNA를 보면 어류의 sperm DNA가 많다. <딸기 DNA 추출>
◎ 실험의 이론적 배경
◎ 실험 방법
1. 딸기 DNA 추출
2. 정량분석 - 분광광도기
3. 정성분석 - Electrophoresis
◎ 결과
◎ 리뷰
1. DNA 구
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DNA sequencing
◆고 찰
지난학기에 배웠던 전기영동을 직접해보니 좀 더 머리에 와 닿는 느낌이었다. 이론상 배울 때에는 사실 외우기에 급급했지 머릿속으로 깊게 이해되진 않았었다. DNA추출 같은 경우 의외로 직접하는 시간보다 기다리는 시
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colony를 picking하여 접종한 후 배양한다 bacterial cells로부터 plasmid DNA를 소량으로 분리하는 방법으로 alkaline lysis procedure을 이용한다. Plasmid DNA는 plasmid를 지니고 있는 bacteria에서 적은 양의 배양으로 분리될 수 있다. Bacteria는 sodium dodecyle sulfate(SDS)
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colony를 띄는 것은 gene이 삽입 되지 못하고 self-ligation 되었다. 반면 plasmid의 lac gene에 잘 삽입이 되면 lac fragment가 만들어지지 않아서 x-gal이 분해되지 않고 white를 띈다. 또, ligation 할 때, vector와 DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1
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추출을 한다. 추출은 두 단계로 이루어 지는데 첫 단계는 extraction buffer를 통해 화학적 반응을 일으켜 직접적으로 세포를 깨는데 그 결과 아래 식과 같은 목적물이 나온다.
목적물로 나오는 DNA는 cell lysates의 점성을 높여서 후에 downstream process
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DNA에 오염되었나, 즉, DNA의 순도를 확인할 수 있는데 실험 결과 A260/A280의 비는 0.957로 순수한 DNA로 여겨지는 1.8보다 훨씬 작다. 따라서 DNA에 단백질이 불순물로 많이 섞여 있다고 결론지을 수 있다.
전기영동을 이용하여 단백질과 DNA의 크기를
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갔을 경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했
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전기영동 결과를 통해 알 수 있었다. 한 개의 종자(4번)만이 대립되는 두 allele을 갖지 못하여, 1개의 밴드만 나타냈기에, 따라서 자식 오염주는 4번이다.
또한 멜론 샘플들의 순도는 80%임을 알 수 있었고, 멜론 종자의 순도검정시 DNA mar
ker를 이
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DNA를 추출하고 혼성화하는 실험을 했습니다. 원하는 결과가 나오지 않으면 처음부터 시작해 더 철저하게 멸균 처리하고 조건에 맞추어 실험했습니다. 반복적인 실험을 통해 성공적인 결과를 얻을 수 있었습니다. 수사자료를 수집하고 분석할
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DNA 정제, 유전형질의 전환(Tranfomation), ELISA assay, transfection, 단백질추출, 약물효능평가, 동물실험을 진행...(이하생략) - 자기소개서
1. 동아ST를 선택한 이유와 입사 후 회사에서 이루고 싶은 꿈을 기술해 주세요.
2. 평소 본인의 취미 또
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