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Transformation of E. coli XL-1 Blue and DM700 with pTrc99A/topAcysB DNA
http://www.bch.msu.edu/bchug/web/bch472/LM5A.html
2) New England Biolab - NEB-5α
http://www.neb.com/nebecomm/products/productC2988.asp
3) 네이버 지식사전 - amphicillin, lac operon
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=293243&nb
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보이는 colony는 한 cell에서 유래된것임.
♠이번 실험은 no.①-⑦까지 이며, colony확인은 다음 실험시간에........ 1.introduction
● Transformation 의 개념
● Competent cell 이란 ?
● Competent cell 을 이용한 Transformation 의 과정
2. materials
3. methods
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transformation을 시킬 때 heat-shock을 이용하였다. heat-shock 외에 transformation을 시킬 수 있는 방법에는 어떠한 것들이 있을까?
- electroporation : 고전압의 전기를 흘려 DNA가 들어가도록 하는 방법
- bacteriophage : 박테리아를 숙주로 하는 파지에 도입코자
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transformation의 과정 중 박테리아에 CaCl2를 처리하여 competent cell로 만들면 plasmid가 cell에 들어갈 수 있게 된다. 여기에 Heat shock를 가하면 plasmid가 cell 안으로 들어가는 효율이 증가된다.
(4)Competent cell이란?
정상적인 bacteria에 화학적 처리를 가하
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4. 실험과정
(1) PCR
(2) Ligation
(3) Transformation & seeding
- ① Ligation 시킨 반응물 5 ㎕를 Top 10 competent cell에 첨가한다.
② 얼음에 5분간 방치한다.
③ 42℃에서 30초간 heat-shock 시키고 즉시 얼음에 1~2분간 둔다.
④ SOC 배지 200 ㎕를 가하고 37도 incu
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B, Preliminary report on fieldwork in Uvs, Mongolia 1993, MacArthur ECCIA unpublished working paper, Cambridge, 1993.
The Times Newspaper, Shock therapy in Mongolia cures ailing economy, 27 April Saturday, 1996.
Worden, Robert and Savada, Andrea (eds.), Mongolia: A Country Study, Washington, D.C, 19
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Heat transfer)의 차이점을 설명하시오
14. 물풍선을 던져서 터뜨리지 않고 받는 방법을 설명하고 이와 관련하여 운동량과 충격량에 대해서 설명하시오.
15. NPSH (net positive suction head)에 대해 설명하시오.
16. Material의 Creep과 Fatigue 현상에 대해
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