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Subcloning에 대해 간단히 조사하시오.
□ Cloning은 동일한 DNA fragment나 cell, organism을 생산해내는 과정을 뜻한다. 우리가 실험에 사용한 cloning은 molecular cloning으로서 지정된 DNA fragment를 증폭시키는 과정을 말하는데 지정된 DNA는 whole gene을 포함하
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Restriction Enzyme(BamH 1, Xho 1) 으로 digestion 한 DNA(gene X+ pGEMTE)를 새로운 벡터인 pGEX6P-1에 넣고, 결과적으로 ligase 하는데 목적이 있다.
또한 이번실험에서는 우선 Gel electrophoresis 후 Gene을 분리시켜 Gel이 표지된 부분만을 잘라, Gel을 녹여, 다시 추출하
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cell에 넣어서 그 결과를 알아보는 실험으로, Ligation이 잘 되었는지를 확인하기 위해 Amp배지에 넣고 Colony의 생성 유무를 확인하는 실험이었다.
우리조의 실험결과, 우선 다른조에 비해 Colony의 양이 상대적으로 많았고, colony의 색이 전부 같은
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oup
Result
1,2,3,4,5,6,9 조 : 뚜렷한 5kb line과 0.35 kb line 관찰, 3kb의 흐릿한 line 관찰
7조 : 뚜렷한 5kb line과 흐릿한 3kb 관찰 0.35kb 관찰 불가능
8조 : 3kb 및 0.35kb 관찰 불가능
11조 : 0.35kb 관찰 불가능
Discussion
이번실험은 그간의 실험과정의 최종 확인작
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subcloning과 sequencing을 이용하여 남아있는 PCR sample(26 step)을 characterize 시킨다.
8. 결론
DD 기법은 추정 차별 발현 유전자들을 신속하게 식별한다. 오류적 포지티브 반응을 없애려면, 식별된 cDNA를 실제 차별 발현 여부를 판단하기 위한 탐침으로써
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