협생과 공생 질소고정 미생물의 유전자 및 생태적 특성

목차

초 록
1. 서 론
2. 질소고정활성이 우수한 Azospirillum 균주 분리 및 그 megaplasmid
의 특성

I. 서 론
II. 재료 및 방법
1. 토양 시료의 채취
2. 사용 균주 및 플라스미드
3. 사용 배지 및 효소
4. Azospirillum 균주의 분리 동정 및 우수 균주의 선발
5. 질소고정활성의 측정
6. Genomic DNA 및 megaplasmid의 분리
7. DNA probe의 제조
8. Hybridization
III. 결과 및 고찰
1. 질소고정력이 우수한 Azospirillum 균주의 분리 및 특성
1-1. 우리나라 논토양의 질소고정활성 비교
1-2. 무농약 재배 논토양의 질소고정활성
1-3. 질소고정력이 우수한 Azospirillum 균주의 분리
1-4. Azospirillum 균주의 동정
1-5. Azospirillum 균주의 질소고정 유전자 비교
2. 분리 균주 Azospirillum의 메가플라스미드와 Rhizobium meliloti nod ABC 유전자와의 상동성
2-1. 분리 Azospirillum 균주의 megaplasmids
2-2. Azospirillum 균주로부터 분리된 megaplasmid와 Rhizobium meliloti nod ABC 유전자와의 상동성

IV. 요 약
Summary

3. Homologous recombination을 이용한 Klebsiella oxytoca nif LA 유전자의 재구성 및 질소고정활성 증진

I. 서 론
II. 재료 및 방법
1. 사용 균주 및 플라스미드
2. 사용 배지 및 시약
3. 사용 효소
4. 플라스미드 분리와 형질전환
5. Genomic DNA의 분리 및 DNA probe의 제조
6. Colony hybridization
7. Southern blot hybridization
8. 질소고정활성 측정
III. 결과 및 고찰
1. Homologous recombination을 위한 plasmid의 제조
2. Klebsiella oxytoca의 형질전환과 homologous recombination 유도
3. Chromosomal recombinant의 선발과 확인
4. Nif A의 overproduction에 의한 Klebsiella oxytoca 균주의 질소고정력 증진
효과

IV. 요 약
Summary

4. Glomus mosseae와 Rhizobium sp. 동시접종에 의한 두과작물의 질소고정활성 증진

I. 서 론
II. 재료 및 방법
1. 내생균근균의 생태적 분포 연구지역
2. 내생균근균의 분리와 동정
3. VA 내생균근균의 감염특성 관찰
4. VA 내생균근균과 질소고정 미생물의 동시접종
4-1. 처리내용
4-2. 처리방법 및 생물재료
4-3. 질소고정활성의 측정 및 식물체 생육조사

III. 결과 및 고찰
1. 다도해 해상국립공원 내의 보길도 지역의 내생균근균의 생태적 분포
1-1. 내생균근균의 분포
1-2. 내생균근균 형태의 지역에 따른 비교
1-3. 내생균근균의 동정
1-4. VA 내생균근균의 형태적 특성 조사
2. 근류균과 VA 내생균근균의 동시접종에 의한 땅콩과 알팔파의 생육 및 질
소고정활성 증진
2-1. Glomus mosseae와 Bradyrhizobium sp.의 동시접종과 땅콩의 생육 및 질소
고정 활성
2-2. Glomus mosseae와 Rhizobium meliloti의 동시접종과 알팔파의 생육 및 질
소고정활성

IV. 요 약
Summary

5. 종 합 고 찰
참 고 문 헌
Abstract
감사의 글

본문내용

ity was increased by 1.5 times compared to single inoculation with Rhizobium meliloti. These results showed that the effect of growth stimulation on alfalfa was caused by the enhancement of nutrient absorption and increase in nitrogen fixing ability through the inoculation with VA mycorrhizal fungi. The effect of dual inoculation with VA mycorrhizal fungi, Glomus mosseae, and Bradyrhizobium sp. R938 on the nitrogenase activity of peanut plant (Arachis hypogeae L. cv. Youngho) were studied. As a result of the dual inoculation with Glomus mosseae and Bradyrhizobium sp. R938 on peanut plant, nitrogenase activity was increased by 1.5 times compared to single inoculation with Bradyrhizobium sp. R938. After 69 days growth of peanut plant, the size of root nodules was also increased due to the mycorrhizal infection. These results suggested that there might be a hormonal effect of VA mycorrhizal fungi in addition to the effect of increase in nitrogen fixing ability through the enhancement of nutrient absorption.
Keywords: Nitrogen fixation, VA mycorrhizal fungi, Azospirillum sp., Klebsiella oxytoca, Bradyrhizobium sp., Rhizobium meliloti.
감사의 글
본 논문이 완성되기까지 끊임없는 관심과 지도로 바른 방향을 이끌어 주신 지도교수 이계호 교수님께 깊은 감사를 드립니다. 귀중한 자료를 빌려주시고 많은 조언을 해주신 논문 심사위원장 농화학과 임선욱 교수님께도 깊이 감사드립니다. 바쁘신 가운데도 논문의 심사를 맡아주셨던 박관화 교수님, 이형주 교수님과 유전공학 연구소의 유익동 박사님의 지도에 머리 숙여 감사드립니다. 또한 깊은 관심과 사랑으로 늘 지켜보아 주시고 격려해 주신 과내의 김재욱 교수님, 전재근 교수님, 서진호 교수님, 문태화 교수님께도 감사드립니다.
특히 연구방향과 자세를 일깨워 주시고 일본에서도 연구할 수 있도록 기회를 만들어 주셨던 유전공학연구소 유익동 박사님의 많은 도움과 배려에 깊은 감사를 드립니다. 논문 작성 방향에 관해 많은 조언을 해주셨고 항상 삶의 지표가 되어 주신 유전공학연구소의 김창진 박사님과 정규옥 선생님, 한국식품개발연구원의 박종현 박사님 내외분께도 깊이 감사드립니다. 논문작성에 많은 시간을 집중할 수 있도록 항상 격려해주시고 도움을 아끼지 않았던 신구전문대학 식품영양과의 이혜준 교수님, 최부돌 교수님, 권종숙 교수님께 감사드립니다. 본 논문의 기반이 되었던 한국과학기술연구원 유전공학연구소 미생물그룹의 여러 연구원들의 우정어린 도움에 감사를 드립니다. 특히, 무더운 여름날 또한 추운 겨울에도 구슬땀을 함께 흘리면서 시료를 채취하며 고락을 나누었던 동료 박동진 연구원과 김원곤 학형께 더할 수 없는 고마움을 느낍니다. 기기분석에 도움을 주었던 유인자씨와 이인경씨에게도 감사를 드립니다. 일본에서의 연구중 도움을 주었던 동경대학 우오즈미 교수님, 농촌진흥청 농업기술연구소의 김영미 박사님, 한국 식품개발 연구원 손동화 박사님 내외분, 동경대학 농학부 조병훈 선배님, 유전공학연구소 홍순광 박사님께도 깊은 감사를 드립니다. 균근 연구에 많은 자료를 빌려주며 도움을 준 주광영 학형, 산림청 토양미생물과 구창덕 박사님, 서울대 산림자원학과 이경준 교수님과 김종주 학형에게 깊은 감사를 드립니다. 우리나라 농업문제에 대해 방향을 제시해주는 아산군 농민후계자 이길영 군, 시료채취에 도움을 주었던 아산군 농민후계자 이호열씨 등 아산군 농민들께 감사를 드리며 연구자로서의 의무와 책임이 막중함을 다시 한번 느껴봅니다. 귀중한 책을 빌려준 유전공학연구소 이강현 연구원, 공추련 문헌을 준 한남수 학형, 특허 관련 문헌을 찾아준 두산기술원 신성균 박사님에게도 감사를 드립니다. 식품공학과 변용태 주임 선생님의 도움과 선배의 논문작성을 위해 오랫동안 궂은 일을 대신해준 연구실 후배 안준배, 김상범, 이승철 군과 박헌국 학형께 깊은 감사를 드립니다. 논문정리때까지 많은 도움을 준 신구전문대 김인호 교수님, 이경돈 교수님과 조교 김윤정 선생, 손희선 선생께도 깊은 감사를 드립니다. 논문 인쇄를 맡아주신 효성사 황효상 사장님께도 감사드립니다.
우리나라 과학기술의 방향과 과제에 관해 항상 많은 토의를 했던 징검다리 모임의 이인영, 조재환, 김 남, 전재흥, 고정헌 학형의 정성어린 도움에 감사드립니다. 환경문제에 관해 많은 토론을 나누었던 벗 최 승 군, 흙을 살리는 방향을 연구하는 흙살림연구소 이태근 소장님, 박동섭 실장님, 성기남 사무국장님, 서오석 부장님과 충북 농촌개발회 조희부 선생님께서 베풀어 주셨던 인간적인 정이 논문 작성중 큰 힘이 되었습니다. 그리고 일본 유기농업 견학 기회를 마련해주시고 도움되는 많은 이야기를 해주신 한살림 생활협동조합 이상국 상무님과 김재겸 과장님, 고베대학 김기섭씨와 야스다 교수님, 성미마을 최재두 회장님, 음성군 정용기 선생님, 당진군 정광영 선생님께도 깊이 감사드립니다.
끝으로 항상 좋은 후원자이신 부모님의 사랑과 아내의 정성어린 내조에 한없는 고마움을 전합니다.

키워드

질소고정,   Azospirill,   근류균