목차
Ⅰ. 개요
Ⅱ. 면역(면역체계)의 개념
Ⅲ. 면역(면역체계)의 종류
1. 선천 면역(비특이성 면역)
2. 선천 면역의 항원인식 및 항체 생성
1) 호중성구
2) 림프구
3) 단핵구
4) 대식 세포
3. 획득면역
Ⅳ. 효소의 개념
Ⅴ. 제한효소의 특성
Ⅵ. 제한효소의 종류
1. I 형 제한효소
2. II 형 제한효소
1) Sticky end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
2) Blunt end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
3) DNA 상의 인식부위와 절단부위가 다른 효소
3. III 형 제한효소
참고문헌
Ⅱ. 면역(면역체계)의 개념
Ⅲ. 면역(면역체계)의 종류
1. 선천 면역(비특이성 면역)
2. 선천 면역의 항원인식 및 항체 생성
1) 호중성구
2) 림프구
3) 단핵구
4) 대식 세포
3. 획득면역
Ⅳ. 효소의 개념
Ⅴ. 제한효소의 특성
Ⅵ. 제한효소의 종류
1. I 형 제한효소
2. II 형 제한효소
1) Sticky end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
2) Blunt end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
3) DNA 상의 인식부위와 절단부위가 다른 효소
3. III 형 제한효소
참고문헌
본문내용
thylase활성이 인식하는 염기배열은 동일하나 DNA를 절단하는 부위는 일정하지 않으므로, 특정 크기의 DNA 단편을 생성하지 않는다.
2. II 형 제한효소
2만~10만의 분자량을 가진 것이 많으며, 활성발현에 Mg2+.만을 필요로 하고, 2본쇄 DNA분자내의 특정 염기배열(3~6개의 중앙을 축으로 한 2회전 대칭을 나타냄)을 정확하게 인식하여, 그 배열 내 혹은 그 인접부위에서 phosphodiester 결합을 절단하고, 특정의 DNA단편을 생성한다.
II 형 제한효소는 DNA분자내의 4~6개의 특정 염기배열을 인식하여(대개의 경우, 중앙을 축으로 한 2회전 대칭을 하는 염기배열), 그 내부 혹은 인접부위의 특정의 염기간을 정확히 절단하고 그 밖의 부위를 절단하지 않고, 또 그 절단 말단은 3\'OH, 5\'P이고, DNA ligase에 의한 phosphodiester 결합을 형성함으로써 연결이 가능하다. 따라서 DNA구조와 기능의 해명이나 유전자조작 연구에 있어서 재조합 DNA 분자의 제작에서 없어서는 안될 효소이다. DNA 절단양식에 따라 다음과 같이 나눈다.
1) Sticky end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
DNA분자내의 특정의 염기배열내 혹은 그 인접부위에서 몇 개의 nucleotide 떨어진 부위에서 2본쇄 DNA를 절단하고 서로 상보적인 염기배열을 가진 1본쇄 부위를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소이다. 또 절단부위의 위치에 따라 5\' 말단이 돌출되는 것과 3\'말단이 돌출되는 것이 있다.
2) Blunt end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
DNA분자내의 특정의 염기배열내에서 1본쇄 DNA를 같은 부위에서 동시에 절단하여, 가지런한 양 말단을 가진 DNA 단편을 생성하는 효소이다.
3) DNA 상의 인식부위와 절단부위가 다른 효소
인식부위가 비대칭이고 인식부위에서 몇 nucleotide 떨어진 부위를 절단하는 성질을 가진다. 한편, 이들 염기배열 특이성이 효소반응조건에 따라 변화한다는 것이 제한효소 Eco R1, Bam H1 등에서 보고되었다. Eco R1은 PH 7.0 부근에서 보통의 염농도의 존재 하에서는 -G^AATTC-를 인식하여 GA사이를 절단하나 PH 8.0의 저염농도 -^AATT-를 인식하여 A의 인접부위에서 DNA를 절단하게 된다.
특히 II 형 제한효소는 이들의 염기배열 특이성을 활용하여 단용 또는 알맞은 조합에 의하여 병용함으로써 목적으로 하는 유전정보 부위를 함유하는 DNA 단편의 절단 분리, plasmid나 phage DNA를 사용한 vector의 개환, vector의 소형화나 복합체의 작성, 제한효소에 의한 절단 부위를 map한 제한지도의 작성 등에 쓰이고 있다
3. III 형 제한효소
Endonuclease활성과 methylase활성을 가지며, Mg2+, ATP와 SAM의 존재 하에서 DNA의 분해와 methyl화가 동시에 일어나 DNA사슬 상에 인식부위에서 상당히 떨어진 부위를 절단하지만 ATP는 분해하지 않는다. 이 형의 효소는 DNA분자내의 특정 염기배열을 인식하여 그 배열에서 상당히 떨어진 특정부위에서 phosphodiester결합을 절단한다. 이 형에 속하는 Eco P1이나 Eco P15는 I형과 II형의 중간 특이성을 나타내는 효소이다.
참고문헌
ⅰ. 김길웅 외 8명, 일반생물학, 형설출판사, 1994
ⅱ. 김윤수, 생화학, 의학문화사, 1993
ⅲ. 김기태 외 6명, 효소영양학개론, 한림원, 2003
ⅳ. 노봉수, 식품효소 공학, 신광출판사, 2005
ⅴ. 정동효, 효소학개론, 대광서림, 1982
ⅵ. 효소공학, 태음출판
ⅶ. 한국분자생물학회, 분자생물학, 아카데미서적, 1997
2. II 형 제한효소
2만~10만의 분자량을 가진 것이 많으며, 활성발현에 Mg2+.만을 필요로 하고, 2본쇄 DNA분자내의 특정 염기배열(3~6개의 중앙을 축으로 한 2회전 대칭을 나타냄)을 정확하게 인식하여, 그 배열 내 혹은 그 인접부위에서 phosphodiester 결합을 절단하고, 특정의 DNA단편을 생성한다.
II 형 제한효소는 DNA분자내의 4~6개의 특정 염기배열을 인식하여(대개의 경우, 중앙을 축으로 한 2회전 대칭을 하는 염기배열), 그 내부 혹은 인접부위의 특정의 염기간을 정확히 절단하고 그 밖의 부위를 절단하지 않고, 또 그 절단 말단은 3\'OH, 5\'P이고, DNA ligase에 의한 phosphodiester 결합을 형성함으로써 연결이 가능하다. 따라서 DNA구조와 기능의 해명이나 유전자조작 연구에 있어서 재조합 DNA 분자의 제작에서 없어서는 안될 효소이다. DNA 절단양식에 따라 다음과 같이 나눈다.
1) Sticky end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
DNA분자내의 특정의 염기배열내 혹은 그 인접부위에서 몇 개의 nucleotide 떨어진 부위에서 2본쇄 DNA를 절단하고 서로 상보적인 염기배열을 가진 1본쇄 부위를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소이다. 또 절단부위의 위치에 따라 5\' 말단이 돌출되는 것과 3\'말단이 돌출되는 것이 있다.
2) Blunt end를 가진 DNA 단편을 생성하는 효소
DNA분자내의 특정의 염기배열내에서 1본쇄 DNA를 같은 부위에서 동시에 절단하여, 가지런한 양 말단을 가진 DNA 단편을 생성하는 효소이다.
3) DNA 상의 인식부위와 절단부위가 다른 효소
인식부위가 비대칭이고 인식부위에서 몇 nucleotide 떨어진 부위를 절단하는 성질을 가진다. 한편, 이들 염기배열 특이성이 효소반응조건에 따라 변화한다는 것이 제한효소 Eco R1, Bam H1 등에서 보고되었다. Eco R1은 PH 7.0 부근에서 보통의 염농도의 존재 하에서는 -G^AATTC-를 인식하여 GA사이를 절단하나 PH 8.0의 저염농도 -^AATT-를 인식하여 A의 인접부위에서 DNA를 절단하게 된다.
특히 II 형 제한효소는 이들의 염기배열 특이성을 활용하여 단용 또는 알맞은 조합에 의하여 병용함으로써 목적으로 하는 유전정보 부위를 함유하는 DNA 단편의 절단 분리, plasmid나 phage DNA를 사용한 vector의 개환, vector의 소형화나 복합체의 작성, 제한효소에 의한 절단 부위를 map한 제한지도의 작성 등에 쓰이고 있다
3. III 형 제한효소
Endonuclease활성과 methylase활성을 가지며, Mg2+, ATP와 SAM의 존재 하에서 DNA의 분해와 methyl화가 동시에 일어나 DNA사슬 상에 인식부위에서 상당히 떨어진 부위를 절단하지만 ATP는 분해하지 않는다. 이 형의 효소는 DNA분자내의 특정 염기배열을 인식하여 그 배열에서 상당히 떨어진 특정부위에서 phosphodiester결합을 절단한다. 이 형에 속하는 Eco P1이나 Eco P15는 I형과 II형의 중간 특이성을 나타내는 효소이다.
참고문헌
ⅰ. 김길웅 외 8명, 일반생물학, 형설출판사, 1994
ⅱ. 김윤수, 생화학, 의학문화사, 1993
ⅲ. 김기태 외 6명, 효소영양학개론, 한림원, 2003
ⅳ. 노봉수, 식품효소 공학, 신광출판사, 2005
ⅴ. 정동효, 효소학개론, 대광서림, 1982
ⅵ. 효소공학, 태음출판
ⅶ. 한국분자생물학회, 분자생물학, 아카데미서적, 1997
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