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단백질의 존재 여부를 알 수 있다. 정확한 결과를 위해 항체의 비특이적 결합을 방지해주는 TBST로 세척해 준 다음 peroxidase의 기질인 luminol이 peroxidase에 의해 산화되면서 푸른색 빛을 내는 것을 X-Ray film, 또는 CCD에 감광시키는 방법인 ECL법을 통
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단백질을 증가시킨다.
DAB법으로 검출되지 않을 경우 화학 발광법으로 검출.
Tween-PBS를 Tween-TBS 등으로 교환.
Membrane 전체가 검을 경우
blocking이 불충분
항체가 변성하여 있는 경우
반드시 Tween을 넣은 blocking액을 사용하고, overnight.
표식한 proteinA
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http://www.ajou.ac.kr/%7Ebiotech/study/western/western%20blot.htm
http://home.pusan.ac.kr/%7Emolbio99/western.htm 1. Introduction
2. Material & Methods
3. Results
4. Discussion
* ECL의 원리와 Enzyme과 antibody의 결합원리.
5. Reference
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법은 아미노산, 뉴클레오티드, 단백질 들과 같은 하전된 물질들을 분리하거나 분석하는 데 매우 효과적인 수단으로 이용된다.
Acrylamide gel은 DNA 또는 단백질의 전기영동에 이용될 수 있는데, 특히 단백질의 경우는 SDS (sodium dodecyl sulfate)를 포
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단백질 정량의 여러 방법 중 BCA(Bicinchoninate)가 Cu+와 복합체를 형성해 자색으로 발색하는 원리를 이용한 BCA법으로 단백질을 비색 정량 하는 방법을 이해하고, 실제로 mouse의 stomach cell의 단백질을 정량 한다.
BCA ( Bicinchoninic acid) 분석법
sam
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