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multiplex polymerase chain reaction의 개발. 국립보건연구원 2000 국립보건원보 Vol.37 No.-
신승희. 고열로 인한 간질중첩증 환아에서 발생한 범발성 혈관내 응고 증후군 2례, Korean Journal of Pediatrics, 2001, 44권 9호 기초간호과학 기초간호과학 호흡기 바
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실험의 동기 및 의의
PCR보다 높은 검출능률
SERS
High Sensitivity
High Selectivity
Multiple Color Scanning
Distinguish target DNA
Multiplexed Detection
Background Knowledge
First
Surface Enhanced Raman Scattering
Second
Polymerase Chain Reaction
Third
Flat bed Scanner 1. 실험의 동
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polymerase를 두 개 사용하는데, 그중 하나가 minor-proofreading을 할 수 있어서, 긴 DNA를 증폭할 때 error rate를 감소시켜 준다.
10) Asymmetric PCR
Single strand를 얻을 목적으로 이용하는 PCR방법이다. Primer를 두 개 사용하는데 두 primer를 농도가 100:1로 섞어
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polymerase에 의한 DNA 복제의 특징을 이용한다. DNA polymerase가 외가닥 DNA를 주형으로 해서 상보적인 DNA를 합성한다. 이러한 외가닥 DNA는 두가닥 DNA를 끓임(denature, 변성)으로써 간단하게 얻을 수 있다. DNA polymerase가 DNA합성을 시작하게 위해서는 시
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PCR 정의
캐리 멀리스(Kary B. Mullis)에 의하여 1985년에 개발된 중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction, PCR)은 현재 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에 사용하고 있는 검사법으로, 검출을 원하는 특정 표적 유전물질을 증폭하는 방
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Polymerase Chain Reaction)
PCR은 원하는 DNA를 대량으로 증폭시키는 방법이고, in situ hybidization (ISH)은 세포나 조직에 존재하는 극미량의 DNA 및 RNA를 찾아낼 수 있음은 물론 원하는 유전자들의 위치까지 확인할 수 있는 방법이다. ISPCR은 이 두 가지 방
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PCR의 원리 및 순서
중합효소 연쇄 반응(Polymerase chain reaction)
PCR법에 의해 세포·조직에서 아주 미량의 DNA를 추출해 특정영역 DNA를 증폭해 유전자 진단 등에 이용하는 것이 가능하다.
주형이 되는 double strand DNA의 표적 부분의 양끝 염기
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Polymerase chain reaction
중합효소 연쇄반응이 이용되는 실험
중합효소 연쇄반응의 의학적 응용
중합효소 연쇄반응은 다음과 같이 세 단계로 이루어진다.
1) DNA의 변성(denaturation)
2) Primer의 결합(annealing)
3) DNA의 합성(polymerization)
A. Genomic DN
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polymerase requires a divalent cation (in this case Mg++ from the MgCl2) in order to function.
The Mg++ also helps stablize the two strands. A normal concentration of Mg++ in the reaction is 2.5uM. Higher concentrations yield greater promiscuity of the polymerase (ie false priming). Lower concentrat
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aq polymerase는 그 기능은 유지한다. 그리하여 PCR시 Taq polymerase를 사용한다.
우리는 35번의 cycles을 돌려 얻고자 하는 DNA를 증폭시켰다. 각 Cycle이 돌아지면서 각 과정마다 원하는 온도가 있다. 95℃에서는 주형 DNA를 변성시켜 이중나선을 풀어준다
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