|
마이크로 피펫을 사용하여 겔로 loading한다. (각 샘플loading 시 새로운 팁으로 교체하며 피펫이 gel을 뚫지 않도록 빠르고 정확하게 넣는다)
3. DNA시료를 넣어준 comb 쪽은 (-)전극, 반대편은 (+)전극으로 전압을 걸어 30~40분간 100V로 전기영동을 시작
|
|
|
DNA조각들 의 혼합물을 분리할 수 있다. 그뿐만 아니라 겔 상에서 DNA는 브롬화에 티듐(ethidium bromide)과 같은 형광성 시약으로 처리하면 염색되므로 자 외선 하에서 DNA를 직접 관찰할 수 있다. 아가로오스 겔을 통한 DNA의 이동속도는 DNA 분자의
|
|
|
DNA가 내려오면 자외선 하에서 확인한다.
* 낮은 전압에서 선형으로 된 DNA조각의 이동속도는 부하되는 전압에 비례한다. 그러나 전기장에서 전류의 흐름이 커짐에 따라 높은 분자량을 가진 DNA조각의 이동속도는 빨라지게 되므로 전압이 올라
|
|
|
DNA가 두개의 전기장의 영향하에서 농축되어진 아가로오스 겔로 이동된다. 두 전기장이 거의 수직이며, 전기장력은 고르지 않고 서로 바뀌거나 간헐적으로 된다. 일반적으로 높은 겔 농도와 전압 기울기(gradient) 하에서 DNA 분자가 겔의 구멍으
|
|
|
이동한다. 이때 DNA가 이동하는 정도는 여러 가지 요인의 영향을 받는다. 기본적으로 분자량이 커질수록 늦어지며 젤의 밀도(아가로오스 농도)가 클수록 늦어진다. 또한 DNA의 분자량이 같더라도 구조에 따라서 움직이는 속도가 다르다. 예를
|
|
 |
분자량이 큰 DNA를 분리하는데 적합하기 때문에 DNA 크기 측정에 이용된다. DNA 전기영동도 단백질의 전기영동과 마찬가지로 큰DNA가 작은 DNA보다 멀리 이동하지 못한다. 하지만 DNA의 경우 같은 크기일 지라도 형태에 따라 이동속도가 달라질 수
|
|
|
DNA의 음전하를 막아 DNA가 세포막을 통과할 수 있게 된다. 따라서 칼슘이온을 처리해 genetic competence를 갖게 한 E.coli를 competent cell 이라 한다. Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일// 왓슨의 분자생물학 6판//p748
따라서 이번 실험을 통
|
|
|
DNA 기술은 박테리오파지와 플라스미드에 관한 연구와 DNA에 작용하는 효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된 업적들이 직접 기여했지만, 그 이전부터 꾸준히 계속되어 온 유전과 분자생물학에 대한 연구의 결과
|
|
|
DNA는 cell lysates의 점성을 높여서 후에 downstream processing 과정에서 생산물의 원하는 yield를 얻는데 어려움을 겪게 된다. 따라서 아래 Eq. 3와 같이 PEI(polyethyleneimine)가 extraction buffer에 첨가되어 DNA-PEI complex로 선택적 침전을 일으킨다. 단 침전 율은
|
|
|
경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
|
|
|
분자 생물학과 유전자학을 통해 생명 현상에 대한 기초적인 이해를 넓혔습니다. 이들 과목에서 다룬 DNA 복제, 유전자 발현, 세포의 신호전달 경로 등에 대해 배우면서, 생명체가 어떻게 유전 정보를 전달하고 이를 통해 기능을 수행하는지를
|
|
 가격 :
할인가 : 23,000원(36페이지)
|
 가격 :
할인가 : 36,000원(36페이지)
|
 가격 :
할인가 : 6,500원(5페이지)
|
 가격 :
할인가 : 6,500원(5페이지)
|
 가격 :
할인가 : 36,000원(36페이지)
|
 가격 :
할인가 : 23,000원(36페이지)
|
메뉴펼치기
과학실험 연구 템플릿
과학실험 연구 템플릿
과학실험 연구 템플릿