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마이크로 피펫을 사용하여 겔로 loading한다. (각 샘플loading 시 새로운 팁으로 교체하며 피펫이 gel을 뚫지 않도록 빠르고 정확하게 넣는다)
3. DNA시료를 넣어준 comb 쪽은 (-)전극, 반대편은 (+)전극으로 전압을 걸어 30~40분간 100V로 전기영동을 시작
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전기영동법은 실험실에서 매우 자주 이용되고 중요한 실험이기 때문에 그 종류도 다양하다. 우리 조는 저희가 앞으로 실험할 Agarose gel 전기영동에 중점을 두어 발표를 진행하겠다. 전기영동
전기영동법의 종류
Gel electrophoresis (젤 전기
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영동, electropH oresis)
3. 전기영동의 종류
3-1. 이동 계면 전기영동법 (Moving boundary electrophoresis)
3-2. 띠 전기영동법 (Zone electrophoresis)
3-3. 불연속 젤 전기영동법 (Disc-gel electrophoresis)
3-4. SDS젤 전기영동법
3-5. 아가로오스 젤 전기영동법 (Agarose gel
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agarose electrophoresis에서 쓴다.
* TBE ( Tris borate EDTA) : DNA 분자량이 작은 경우,
DNA sequencing에 쓴다.
6. 결과
- DNA가 전체적으로 음전하를 띠고 있는 것을 이용하여 DNA 단편을 크기별로 분류하는 전기 영동법을 이용하여 실험을 진행한 결과는 자외
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전기영동의 종류
1. 이동계면 전기영동법 (Moving boundary electrophoresis)
2. 띠 전기영동법 (Zone electrophoresis)
- 거름 종이
- 한천 겔
- 아세트산 셀룰로오스
- 녹말 겔
- 아크릴아미드 겔
3. 불연속 겔 전기영동법 (Disc-gel electrophores
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
3. LDH의 활성 측정
4. Gel filtration chromatography를 이용한 LDH 단백질의 정제
5. Ion exchange chromatography를 이용한 LDH 단백질의 정제
Ⅲ. 결론 (결과 및 고찰)
1.
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법에 의한 무우 종자의 순도 검정. 서울대학교 1-27
- 이지은, 김성길(2009) DNA marker를 이용한 멜론의 일대잡종품종 순도검정. 1-5
- 김두환 DNA marker를 이용한 F₁순도 검정. 한국원예학회지 13-13
- http://joonyoungsun.tistory.com/entry
- http://100.naver.com/
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