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Hassalbalch equation
3) 몰농도
4) buffer를 만드는 법, 계산과정
5)실험도구 및 과정
2. ion-exchange column chromatography
1)column chromatography의 원리
2)resin
-anion exchanger
-cation exchanger
3)elution (용출)
4)positive control & negative control
5)실험과정 및 도구
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column에 주입하고 비활성기체 이동상의
흐름을 이용하여 용리
• Gas Chromatography의 역사
➢ 1941년 Martin과 Synge에 의해 처음 소개
➢ 10년 후 이 방법의 가치가 실험적으로 증명
➢ 1955년에 기체 크로마토그래피 장
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column efficiency
최적의 분리를 위해서는 날카롭고, 좌우 대칭의 크로마토그래프 피크를 얻어야 한다. 이는 피크 폭 늘어짐(band broadening)과 관련 있으며, 컬럼(column)의 효율을 측정하는데 유익하다.
The Theory Plate Model of Chromatography(크로마토그래피
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의 10배인 5ml의 양으로 wash를 해주어야 하는데, 한번에 5ml를 쓰는 것이 아니라 1ml씩 총 5번을 wash해준다. wash를 해줄 때에는 bead와 buffer가 다 뒤집힐 정도로 수직으로 강하게 분사한다. 강하게 분사하면 tip에 용액이 묻을 수가 있으므로 파이펫
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주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.
목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기
실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.
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column 을 사용할 수 있기 때문에 분리능이 크다는 것과 정지상과 이동상 사이에 시료의 성 분이 확산속도가 크므로 분석시간이 비교적 짧다는 것이다.
단점 : ① 검출기는 모든 시료성분에 대하여 동일하게 정량적으로 감응해야한다. 그러므
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는 정제 원리에 대해 배우고, 정제공정 중 한 단계를 스스로 설계하여 수율을 약 63%에서 77%로 향상시킨 경험이 있습니다. 크로마토그래피 column을 통과할 때까지는 펩타이드 수율이 95% 이상 나왔으나 탈색 공정에서 active carbon을 지나갈 때 수
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