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의 10배인 5ml의 양으로 wash를 해주어야 하는데, 한번에 5ml를 쓰는 것이 아니라 1ml씩 총 5번을 wash해준다. wash를 해줄 때에는 bead와 buffer가 다 뒤집힐 정도로 수직으로 강하게 분사한다. 강하게 분사하면 tip에 용액이 묻을 수가 있으므로 파이펫
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DEAE sepharose anion exchange chromatography를 이용하여 단백질을 분리정제 한다. 또한 분리정제 된 결과를 ELISA에 넣어 수치를 파악하고 이러한 결과 분석을 다음 실험의 결과를 예측한다.
4. Introduction
① Chromatography
크로마토그래피(chromatography)란 다
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Hassalbalch equation
3) 몰농도
4) buffer를 만드는 법, 계산과정
5)실험도구 및 과정
2. ion-exchange column chromatography
1)column chromatography의 원리
2)resin
-anion exchanger
-cation exchanger
3)elution (용출)
4)positive control & negative control
5)실험과정 및 도구
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Chromatography
- 크로마토그래피는 이동상과 고정상을 이용하여 혼합물을 분리해내는 방법이다. 고정상(stationary phase)은 고체이고, 이동상(mobile phase)는 액체 또는 기체이다. 혼합물에 있는 각 성분이 두 상과 친화력이 다르면 계를 통과할 때 다
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anion exchange (음이온 교환) chromatography 를 실시하였다. 약산성 음이온 교환수지인 Amberlite IRA-68 column에 시료를 통과시키고 gradient chamber를 이용하여 15 mM citrate phosphate buffer를 pH 5∼3으로 하여 용출, 활성분획을 모았다. 염(salt)를 제거한 후 감압농
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anion exchange chromatography with pursed amperometic detection(HPAEC-PAD)분석은 detached N-glycans의 total hydolysis 후에 얻어진 것으로 수행 되었다. 이 분석적 방법은 KDO와 sialic acid를 완전히 녹이는 것으로 N-acetylneuraminic acid는 hyperhydric regenerant와 종양조직에서 얻
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