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혼합되지 않도록 한다.
<단백질 정량>
① Protein sample과 BSA를 얼음위에서 녹인다.
② 샘플과 blank에 들어간 DW 8ul를 먼저 넣는다.,
③ 96well plate에 1mg/ml BSA를 ½로 serial dilution한다.
④ Blank 값을 자을 buffer를 5배 희석하여 넣어준다.
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protein의
concentration을 측정한다.
실험 이론
1. 단백질 정량
단백질 정량은 알고자 하는 시료의 단백질의 양이나 농도를 정량적으로 알아내는 것
① Kjeldahl assay
② Lowry assay
③ BCA method
④ Bradford assay
2. Bradford Assay
1) 정
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단백질의 조성에 따라 차이가 많이 나므로 부정확할 수 있고 pH나 ionic strength에 의해서도 영향을 많이 받는다.
ⅱ) BCA (Bicinchoninic Acid) Assay
BCA Assay의 첫 번째 단계는 Cu2+가 Cu1+로 바뀌는 Biuret reaction이고, 두 번째 단계는 BCA가 Cu1+과 화합물을 형
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단백질 정성 및 정량(BCA 법) 및 탄수화물 정성
(pre-report)
1. Introduction
‣ 단백질
‣ 단백질의 정성반응에는 크게 정색반응, 침전반응, 응고반응으로 나눌 수 있다.
‣ 단백질의 정량법에는 UV absorption assay, Bicinchoninic acid assay(BCA),
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의 펩티드 결합과 접하면 1가 이온으로 환원이 되며 이를 ‘Biuret reaction’이라고 한다. 이는 뷰렛반응으로 보라색을 나타내는 것을 말한다. 실험방법은 다음과 같다.
1. 추출한 단백질을 BCA와 같이 튜브에 넣는다.
2. 흡광도를 측정하여 그 값을
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