|
잘리는 양상이 다르다.... 1. 실험일자
2. 실험목적
3. 서론
(1) PCR
(2) DNA 클로닝
(3) Plasmid preparation
(4) 전기영동
4. 실험과정
(1) PCR
(2) Ligation
(3) Transformation & seeding
(4) Plasmid preparation
(5) 전기영동
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌
|
|
|
DNA 손상으로 인한 한계를 느낌.
이에, PCR과 Cloning, 전기영동 실험을 계획.
블로팅과 유전자치료에 관심을 가지게 됨.
배경지식(
플라스미드란?
벡터란?
왜 플라스미드를 벡터로 가장 많이 이용하는가?
클로닝이란?
클로닝과정
열 충
|
|
|
52 X
6. 고찰
1) 원래는 plasmid와 DNA가 제대로 ligaion이 되었는지 확인하기 위해 restriction mapping을 사용하지만 지난주에 ligation한 plasmid와 DNA를 사용하지 않아서 조교님께서 주신 plasmid + DNA ligate의 restriction enzyme site를 결정하기 위해 mapping을 실시
|
|
|
1. 제목
2. 목적
3. 원리
4. 재료
5. 방법
|
|
|
DNA probe를 이용한 in situ hybridization을 시행하거나 Southern blot hybridization을 시행하는 것이 좋은 방법이 된다. 효율이 별로 높지 못한 방법임에도 불구하고 ISPCR에 대한 관심이 최근 크게 증가하고 있는 것은 여러 가지 질병들의 조기 발견에 큰 도
|
|
 |
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
1㎕
5' primer
1㎕
3' primer
1㎕
DW
17㎕
total
20㎕
< R E F E R E N C E >
1) Gene cloning and DNA analysis An Introduction, T.A.Brown, Fourth Editi
|
|
|
DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야 한다. ligation이 잘 되었는지 확인하기 위해서는 cloning 까지 마쳐야 한다. cloning이 금방 끝나는 것이 아니라 오래 걸린다. 또, 제대로 colony가 뜨지
|
|
메뉴펼치기
