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영양 생화학 실험
1. 주제 RT(Reverse Transcription)-PCR , PCR (polymerase chain reaction)
2.
재료
및
기구 기구 PCR, mini centri, PCR tube, e.p tube, incubator, micro pipette, glove, ice box.
시약 1) RT-PCR
DEPC, RNA sample, oligo dT, RT buffer, dNTP, RT enzyme., Thermal Cycler
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PCR(reverse transcription-PCR)
PCR법과 역전사 효소 반응을 혼합한 RT-PCR법은 세포에서 추출한 mRNA에서 cDNA를 합성하고 이것을 주형으로 하여 PCR법으로 증폭하고 polyacrylamide 전기 영동으로 분석하는 기술이다. 이 방법으로 mRNA양을 추정하고 전사 레벨
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PCR(reverse transcription-PCR)
PCR법과 역전사 효소 반응을 혼합한 RT-PCR법은 세포에서 추출한 mRNA에서 cDNA를 합성하고 이것을 주형으로 하여 PCR법으로 증폭하고 polyacrylamide 전기 영동으로 분석하는 기술이다. 이 방법으로 mRNA양을 추정하고 전사 레벨
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RT(reverse transcriptase) PCR이란?
RT-PCR이란 P.Seeburg(1986)에 의해 RNA를 찾고 분석하는데 도입된 방법으로 mRNA(messenger RNA)로부터 reverse transcription 과정을 통해 얻어진 cDNA(complementary DNA)를 PCR로 증폭하는 방법이다. 이러한 방법은 RNA 검사의 sensitivity를
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PCR 산물을 비교함으로써 서로 다른 세포로부터 증폭된 PCR 산물에 차이가 있는지 없는지를 확인하는 방법 -PCR의 3단계-
1. DNA의 변성(Denaturation)
2. Primer의 결합(Annealing)
3. DNA의 합성(Polymerization)
RT-PCR (Reverse transcription PCR)
Real time PC
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PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Disc
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