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SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)
이 방법은 단백질을 분자량에 따라 분리하는 방법으로 단백질을 SDS로 처리하면 비공유결합이 전부 파괴되어 변성될 뿐만 아니라 소합체성 단백질인 경우에는 각각의 단위체로 분리되기 때
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단백질들이 어떤 fraction에 위치하는지 확인한 후 그 fraction을 이용하여 분리 정제에 이용하면 된다.
3. 전기영동
① SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)
SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 방법으로 단백질을 SDS로 처리
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단백질의크기에 따라 6~15%를 주로 사용하며 pH는 8.8이다 .
5. Reference
1. http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm
2. David L. Nelson, Michael M. Cox 공저, 2006, 생화학(상), 월드사이언스, pp92~94 1. 실험 목적
2. 실험재료 및 실험방법
(1) 실험
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log.naver.com/cjsdmltjr.do?Redirect=Log&logNo=4419826
http://my.netian.com/~rkdtndus/protein.htm
http://myhome.hanafos.com/~s9euno/ch3-2.htm
http://dasan.sejong.ac.kr/~yjlee/p-agarose%20gel.htm 1.실험제목
2.실험목적
3.실험원리:
1) 단백질의 구조
2) 단백질 전기영동
4. 시약조사
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protein들은 열에 약해 변성되지만, -synuclein은 변성되지 않아서 SDS-PAGE gel에서 band를 볼 수 있다. 이 외에도 band가 여러개 관찰 되 있는 것을 볼 수 있는데, 이는 -synuclein외에 또다른 변성되지 않은 protein이 있는 것으로 보인다.
참고문헌
세포생물
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단백질과 DNA의 정량
A. 단백질의 정량
1) Bradford assay
2) Lowry method
B. DNA의 정량과 순도 측정
2. 단백질과 DNA의 정량
A. SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
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단백질로 설정하여 primer design을 진행하였고, pcr 및 SLIC method를 활용한 뒤에 transformation과 IPTG 처리를 배웠습니다. 그 후 Ni-NTA colum 실험과 SDS-PAGE 후 TagX 단백질의 크기를 비교하여 발현 온도에 따른 binding affinity를 비교하는 연구에 참여하여 실
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