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log.naver.com/cjsdmltjr.do?Redirect=Log&logNo=4419826
http://my.netian.com/~rkdtndus/protein.htm
http://myhome.hanafos.com/~s9euno/ch3-2.htm
http://dasan.sejong.ac.kr/~yjlee/p-agarose%20gel.htm 1.실험제목
2.실험목적
3.실험원리:
1) 단백질의 구조
2) 단백질 전기영동
4. 시약조사
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단백질 상호작용 분석방법
1단계 : 표적 단백질(미끼)에 친화성 꼬리표를 붙인 뒤 다른 단백질과 반응시킨다
2단계 : 미끼 단백질을 친화성 칼럼에 결합시켜 침전시킨다.
3단계 : 이 단백질들을 SDS-PAGE로 정제한다.
4단계 : 단백질을 젤에서 잘라
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AE [Tris-acetate EDTA]
DNA agarose 전기 영동시 주로 사용, 분자량이 큰 경우 사용
TBE [Tris-borate EDTA]
DNA 분자량이 작은 경우, 염기서열 분석 시 사용, RNA 전기영동 시 사용 한다.
SDS-PAGE Running Buffer
주로 단백질을 크기 별로 분리시 SDS-PAGE를 할 때 사용, Gl
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단백질의크기에 따라 6~15%를 주로 사용하며 pH는 8.8이다 .
5. Reference
1. http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm
2. David L. Nelson, Michael M. Cox 공저, 2006, 생화학(상), 월드사이언스, pp92~94 1. 실험 목적
2. 실험재료 및 실험방법
(1) 실험
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SDS-PAGE)
③ Disc gel 전기영동의 원리
④ 단백질의 염색
⑤ Purification of hTrx1 (hTrx1 정제)
5. Materials & Apparatus
※ 5x Protein sample buffer의 조성 및 역할
※ 원심분리기 (centrifuge)
※ Coomassie brilliant blue(CBB) 염색
6. Methods
※ 주
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단백질과 DNA의 정량
A. 단백질의 정량
1) Bradford assay
2) Lowry method
B. DNA의 정량과 순도 측정
2. 단백질과 DNA의 정량
A. SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
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단백질로 설정하여 primer design을 진행하였고, pcr 및 SLIC method를 활용한 뒤에 transformation과 IPTG 처리를 배웠습니다. 그 후 Ni-NTA colum 실험과 SDS-PAGE 후 TagX 단백질의 크기를 비교하여 발현 온도에 따른 binding affinity를 비교하는 연구에 참여하여 실
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