|
restriction enzyme map을 작성하시오. Program을 이용하되, 주요 enzyme site는 유전자를 하나의 선으로 그리고 그 위에 표시하시오.
3. 이 유전자의 coding region (CD)을 pBlueScript plasmid에 cloning 하기 위한 구체적인 실험 design을 하시오. 단 CD는 PCR 방법으로
|
|
|
Abstract
이번 실험은 제한효소 (restriction enzyme)를 이용하여 vector를 절단한 후, agarose gel 상에서 전기영동하여 얻은 결과로 restriction mapping을 하는 것이다. Vector는 pBluescript Ⅱ를 사용하였으며 restriction enzyme은 BamHⅠ과 XbaⅠ을 사용하였다. 실험
|
|
|
restriction enzyme map of a DNA sequence.
DNA 서열을 제한효소 도표로 나타내는 이유로는 DNA 염기서열을 제한효소로 절단하기 때문이다. 다른 식의 표현방식보다 제한효소와 결부하여 설명하는 것이 원칙적으로도, 효율적으로도 좋다.
8) Observe the restric
|
|
|
Restriction enzyme
※ Recombinant DNA
※ 제한효소 (restriction enzyme)
3) DNA ligation과 T-vector를 이용한 PCR product의 cloning
Ⅲ. 유전자가 삽입된 DNA를 세포 내로 주입
1) Transformation
2) 항생제와 LacZ를 이용한 seletion
※ 항생제를 이용한 selection
LacZ를
|
|
|
restriction site가 Xho I에 비해 비교적 가깝게 분포되어 있음을 알 수 있다. 실제 어떤 plasmid가 실험에 사용되었는지는 알 수 없지만 그 plamid의 restriction site는 위 실험 결과에 포함된 size difference를 보인다고 할 수 있다. 아래는 plasmid중 하나인 pRS42
|
|
 |
restriction enzyme이 자르는 장소이다. 따라서 원하는 gene을 알고 있는 장소에 넣을 수 있다. 먼저 ligation하기 전에 plasmid랑 삽입하고자 하는 gene을 모두 같은 restriction enzyme으로 처리해 주면, 대부분 sticky end를 만들기 때문에 plasmid와 gene 사이에 H-bo
|
|
메뉴펼치기
