DNA제한효소

소개글

DNA제한효소에 대한 보고서 자료입니다.

목차

실험 목적
실험 이론
실험기구 및 시약
실험방법
결과 및 결론
고찰
참고문헌

본문내용

보면 거리상 Lambda DNA가 21226부터 3530으로 잘 잘린 것으로 보인다.(Fig.3를 보면 5804~4878은 가까운 거리에 위치하므로 1.0% agarose에서는 한 개로 보일 수 있다고 가정했다.)
agarose의 농도는 전기영동속도에 영향을 줄 수 있다. agarose이 농도가 낮을수록 겔 공극의 치밀도가 감소하며 그에 따라 하전입자의 이동속도가 빨라지고 그 결과 전기영동속도가 빨라져서 더 멀리까지 움직일 수 있다.
따라서 우리 실험보다 더 정확하게 즉, Fig.3 같은 결과를 얻고 싶다면 1.0%보다 낮은 농도의 agarose를 사용하면 가능할 것으로 추정된다. (최적의 농도는 0.7%)
그리고 실험을 할 때는 전기영동이 ()극에서 시작할 수 있도록 조작해야한다. 그 이유는 전기영동은 agarose gel에 전류를 흘려보내 DNA를 분리하는 실험방법인데, DNA는 backbone의 phosphate group이 음전하를 띄고 있어서 언제나 (-)에서 (+)로 이동한다. 그렇기 때문에 전기영동한 결과를 보면 처음 loading한 위치인 ()극에서 반대쪽 (+)극으로 움직인 것을 볼 수 있다.
또한 gel은 다공성 물질이기 때문에 작은 DNA 절편일수록 더 빨리 끌려가게 된다. 따라서 전기영동의 결과에서
()극에서 멀어진 거리는 DNA 절편의 길이에 비례함을 알 수 있다.
Fig.4 DNA의 단량체인 뉴클레오타이드
또한 agarose gel과 전기영동탱크에 들어가는 용액은 같은 농도의 용액을 사용해야 하는데 그 이유는 그 둘이 다를 경우 전기영동과정에서 저항이 발생할 것이기 때문이다.
마지막으로 red safe는 DNA가 특정파장에 오면 위치를 알 수 있게 해주는 DNA염색 시약으로 사람에게 유해한 EtBr의 대체 시약으로 사용되었다. 실험에 사용된 6 x loading buffer는 DNA염색시약이 아니라 얼마나 gel이 이동했는지 가시적으로 보여주는 역할을 한다.
참고문헌
화공생물공학과, 단위조작실험책, P71~76
네이버 지식사전, 두산백과, 제한효소
네이버, 생명과학대사전, 겔전기영동
생물나라, https://www.biozoa.co.kr , DNA marker
S. Robertson, Encyclopedia of life sciences, London: Nature Publishing Group, 2002
분자생물학, 한국분자생물학회, 아카데미서적, 8-10P, 15-17P

키워드

3학년화학전공,   화학공학과,   실험레포트,   생명공학,   ,   DNA제한효소