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한다. 원심분리기는 중심축을 기준으로 고속회전을 하기 때문에 무게를 대칭 되도록 사용하여야 떨림이 없다.
Reference
http://en.wikipedia.org/wiki/Beer%E2%80%93Lambert_law
http://en.wikipedia.org/wiki/Alkaline_phosphatase
http://en.wikipedia.org/wiki/enzyme_kinetics
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1. 실험제목
- Alkaline Phosphatase(AP)의 정제
2. 실험목적
- Ion-exchange chromatography에 의한 단백질 정제 원리를 이해하고, DEAE anion exchange column을 이용한 AP 단백질의 정제기법을 습득하게 된다.
3. 실험원리
(1) Alkaline Phosphatase(AP)
- Phosphatase
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혈청에 일정량의 기질로서(phenylphophate)를 사용하며, 일정량의 기질을 알칼리성 완충액과 함께 첨가하여 일정 시간 가온하면, 혈청 중의 Phosphatase의 작용으로 가수분해되어 phenol을 유리한다. 이 Phenol은 산화 시약의 존재 하에서 4-Amino-antipyrine(c
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alkaline phosphatase(AP)와 특이적으로 결합하는 antibody를 이용해서 단백질 혼합물로부터 AP를 검출 및 확인하고자 한다. I, Introduction
1) Western blot의 정의와 원리
2) Western blot에서 사용되는 membranes
-membrane의 종류: nitrocellulose membrane, PVDF membrane
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Phosphatase(Serum),Serum Alk Phosphatase.
Alkaline Phosphatase (Serum),Serum Alkaline Phosphatase. 알카리성 인산효소[정상치]10-95 IU/L[높 다]골,전이. 골연화증. 구루병. 골절상 Paget's병 (변형성골염),간암. 간염. 담도폐쇄.
담즙성간경변증, 전립선암. 췌장질환. 화골
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alkaline phosphatase
알칼리성 인산효소
APTT
activated partial thromboplastin time
활성 부분적 프로트롬빈 시간
BAE
barium enema
바륨관장
CEA
carcinoembryonic antigen
암태아성 항원
CT
computed tomography
전산화 단층촬영술
ERCP
endoscopic retrograde cholangiopancreatography
역행성
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Alkaline Phosphatase Antibody의 nonspecific binding이다. 네번째는 정제과정에서 문제가 있었을 수도 있다. 다섯 번째는 Nitrocellulose Membrane에 문제가 있었을 수도 있다. Nitrocellulose Membrane은 재질이 hydrophilic 하다보니 protein이 membrane에 붙는 힘이 상대적으
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Alkaline phosphatase
8.0 u/L
TG(Triglyceride)
28-160 mg/㎗
HDL Cholesterol
35-62 mg/㎗
LDL Cholesterol
57-197 mg/㎗
Cholesterol
130-250 mg/㎗
T. Protein
6.5-8.3 g/㎗
7.4
Albumin
3.5-5.1 g/㎗
4.1
AST(aspartate aminotransferase,GOT)
0-40 U/L
23
ALT(alianine aminotransferase,GPT)
0-40 U/L
20
ALP(Alkali
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Alkaline phosphatase
8.0 u/L
7.6
13.4
Cholesterol
130-250 mg/㎗
150
126.2
Albumin
3.5-5.1 g/㎗
3.2
2.9
AST(aspartate aminotransferase,GOT)
0-40 U/L
47
48
ALT(alianine aminotransferase,GPT)
0-40 U/L
24
26
ALP(Alkaline Phosphatase)
40-250 U/L
76
13.4
Total Bilirubin
0.2-1.2 mg/㎗
0.39
Direct Bilirubin
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Alkaline phosphatase를 dig에 붙이는 과정을 순차적으로 진행하는데 각 과정은 30분이상 초과하는 것은 좋지않다. 시간이 길어지면 원래 붙어야할 dig이외에 붙을 수도 있기 때문이다. dig와 alkaline phosphate를 결합시키는 것은 dig를 항원으로 인식하여
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