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전기영동기에 굳은 gel을 조심스럽게 엄지손가락으로 밀어내어 올려두고 1x TAE buffer에 잠길 정도로 넣어준다.
⑩Agarose gel에 DNA marker 3ul과 ⑧번 솔루션 5ul을 각각 well에 넣어준다.
⑪전기영동기를 스위치를 누른 후 gel의 2/3정도에 bromophenol blue가
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DNA를 다시 붙이는 Ligation of DNA를 할 예정이다. 생물의 가장 기본 구조인 DNA를 잘랐다 붙였다 할 수 있는 것을 보면 새삼스레 신기하다는 것을 느낀다. 예비
제목
목적
원리
방법
재료
참고문헌
결과
제목
목적
내용
결과
토의
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DNA와 linear DNA
대부분의 plasmid는 세포내에서 supercoiled circular DNA로 존재하며 이러한 supercoiling은 plasmid replication 과정 중에 topoisomerase에 의해 수행되어진다. plasmid DNA 가닥에 손상된 곳이 없을 때 covalently closed-circular(CCC) DNA를 형성하며 반대로 두
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1. 주제
2. 실험목적
3. 실험원리(서론)
■ 제한효소
1) Type I restriction enzyme
2) Type II restriction enzyme
3) Type III restriction enzyme
■ 제한효소를 이용한 DNA의 절단
■ 전기영동 ( electrophoresis )
■ DNA 정량
(1) DNA의 농도측정 원리
(2)
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제한효소는 Xho Ⅰ → Nde Ⅰ → EcoR Ⅰ의 순서로 넣어준다.
DDW
8μl
DNA
7μl
10x H buffer
2μl
Enzyme
각 1μl
Total
20μl
Table 1. 반응 용액 만들기
(2) 37 ℃의 Incubator에서 1시간동안 반응시킨다.
(3) 전기영동기기에 Agarose gel을 넣고 TAE buffer (1X)를 gel이 잠길
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DNA라도 초나선구조는 표면적이 작기 때문에 전기영동에서 빨리 이동하고 선형구조는 초나선에 비해 표면적이 크므로 늦게 이동하기 때문이다. 본 실험에서는 똑같은 플라스미드 DNA에 제한효소를 처리 한것과 하지 않을 것을 사용하였으므로
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DNA 기술은 1953년 유전자가 DNA라는 사실과 DNA의 구조가 밝혀지면서 예견될 수가 있었다.
이 재조합 DNA 기술은 박테리오파지와 플라스미드에 관한 연구와 DNA에 작용하는 효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된
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DNA Marker 개발. 한경대 산업대학원
- 박효근(1984)동위효소 분석법에 의한 무우 종자의 순도 검정. 서울대학교 1-27
- 이지은, 김성길(2009) DNA marker를 이용한 멜론의 일대잡종품종 순도검정. 1-5
- 김두환 DNA marker를 이용한 F₁순도 검정. 한국원예학
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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DNA와 일치하므로 해당 연구 결과를 인간에게 적용시킬 여지가 높아진다. 앞으로 줄기세포를 이용하여 근육분화에 대한 연구가 활발해 지리라 예상이 된다. 그리하여 기존에 정복하지 못했던 근육관련 질병들을 머지 않아 극복해 낼 수 있을
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