|
a-nitrophenol가 더 극성을 띈다. (원리 3-2) 따라서 A = ortho-nitrophenol, B = para-nitrophenol 이다.
이번 실험은 TLC를 이용하여 cis와 trans, ortho와 para를 분리하는 실험을 하였다. 생각보다 오래 걸렸고, 실험이 잘 안되어서 두 차례 반복하였다. 두 번째 실험
|
|
|
1. 날짜 : 2012. 04. 30
2. 제목 : Enzyme activity에 대한 온도의 영향
3. 실험 목적 : Lipase의 활성에 대한 온도의 영향을 알아본다.
4. 재료
시약 – 0.1 M sodium phosphate buffer solution, 10 mM p-nitrophenol butyrate, 6.2 mg/mL lipase solution
기구 –
|
|
|
Nitrophenol과 p-Nitrophenol이 사용되는데 이 둘은 이성질체로써 분자량이 같다, Nitrophenol은 세 가지 이성질체가 있는데, o-Nitrophenol은 특유한 냄새가 나는 노란색의 바늘 모양 결정으로 녹는점 45℃, 끓는점 216℃이다. 뜨거운 물이나 에테르·에탄올
|
|
|
Nitrophenol의 농도를 계산하려면 다음과 같은 공식이 필요하다. 공식의 는 기준 영점으로 설정한 대조군과 실험군의 농도 차이인데, 대조군의 흡광도는 시간별로 측정할 때마다 샘플을 따서 영점을 수정하는 데에 사용하였으므로 와 같다고 볼
|
|
|
nitrophenolate 농도=0.255/16200=0.0000157M=15.7M
Buffer 5ml+pNPP 0.5ml = 총 반응액 5.5ml
→(5.5×)×15.7=0.086mol.
→0.005g의 효모에 의해 총 0.086mol p-nitrophenolate 생성되었다.
10분간 waterbath에서 incubation
∴고정화효소활성= 0.086mol÷(0.005g효모효소×10min)
=1.76U/g효모효
|
|
메뉴펼치기
