|
Gel 만들기 – 이 과정부터 직접 실습한 내용임.
Purpose : Electrophoresis에 사용할 Acrylamide Gel을 만든다.
Principle:
• Acryamide-bisacrylamide 29:1 : solvent의 역할을 하며, 매우 강력한 신경독성(neurotoxic)을 나타내며 이 효과는 축척 되기 때문에
|
|
|
나름대로 분석해 보세요.
참고로 아래 사진은 겨우살이 sample로 선명한 밴드를 볼 수 있습니다. 1. Metrial
2. Method
1) Agarose gel 만들기
2) Agarose gel 전기영동시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들
3. DNA loading dye
4. 전기영동 buffer
5. Result
|
|
|
4. Purpose : 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기에
|
|
|
Gel의 %를 변화시키면 됨.
- spacer plate와 short plate를 고정 시킨 후 D.W를 넣어서 새지 않는지 확인해준다. 우리 조는 고정이 잘 되지 않아 gel이 새었다. 다음부터 주의해야겠다.
- β-mercapto ethanol이 환원제이므로 얼렸다가 sample을 만들기 직전에 녹
|
|
|
gel을 만든다. (굳힐 때는 comb을 끼워서 well을 만든다.)
3.전기영동장치에 1× TBE를 넣은 후 gel을 넣는다.
4. well의 가장 왼편에 size maker를 넣고 차례로 loading dye와 DNA를 섞은(1:5정도) solution을 주입한다.
5. 전기를 걸어준 뒤 20~30분 기다린다.
6. DNA가
|
|
메뉴펼치기
