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실험 목적
및
원리 목적 형질전환 된 E.coli의 cell로부터 plasmid DNA를 분리하고, 분광광도계를 이용하여 DNA의 농도와 순도를 분석한다. 또 agarose gel 상에서 electrophoresis 하여 목적하는 DNA의 크기를 분석할 수 있다.
원리
1) Plasmid DNA 분리 (
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1. Purpose
2. Introduction
3. Material & Supplies
4. Procedure
◎ Plasmid 분리 실험
◎ Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동
5. Result
◎ Plasmid 분리 실험
◎ Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동
6. Discussion(자필)
7. Refrence
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실험 당시 기간 관계 상 실험을 클린존이 아닌 곳에서 진행을 한 것이 큰 원이라고 생각된다. Plasmid DNA 분리와 전기영동을 실험한 결과 전기영동을 통해서 4kb DNA가 검출되었다.
Ⅴ.참고 문헌
·David L et al, 2014, (레인저) 생화학, 월드사이언스, p
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목차
1. 서 론
2. 실험 방법
2.1. LB Agarose 배지와 LB Broth 제조 및 멸균
2.2. LB-Ampicilin 첨가
2.3. E. coli JM109 (pGEM-T-Easy-DXS, pBlueScript-KS(+)) 접종
2.4. Plasmid 분리
2.5. 제한 효소 절단
2.6. Agarose Gel 제작
2.7. 전기영동 및 DNA 확인
3. 결과
3.1. E. c
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실험 목적
Plasmid DNA의 구조적 특징을 이해하고 이를 이용하여 Plasmid DNA를 Purification한다.
DNA Purification 한 것을 전기 영동을 통해서 DNA를 크기 별로 분리하여 확인한다.
Plasmid DNA
Bacteria내에서 Chromosomal DNA와는 별도로 발견되는 작은 DNA, Ch
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전기영동하면 같은 염기서열의 같은 크기 DNA라도 이동하는 거리가 제각기 다릅니다. Size marker로 쓰는 짧은 DNA는 linear form입니다. 이렇게 전기영동으로 size를 비교할 수 있는 DNA는 linear form DNA 뿐입니다.
5.실험 결과
6.고찰 및 토의
7.참고 문헌&
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-플라스미드 분리
-원심분리기
원심분리기는
-아가로스
3. 실험준비물
1)소모성 재료
2)기기
4. 실험방법
1)Plasmid mini prep kit을 이용한 정제
2)아가로스 젤 만들기
3)전기영동
3)DNA 확인
5. 실험결과
6. 고찰
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영동의 종류
3-1. 이동 계면 전기영동법 (Moving boundary electrophoresis)
3-2. 띠 전기영동법 (Zone electrophoresis)
3-3. 불연속 젤 전기영동법 (Disc-gel electrophoresis)
3-4. SDS젤 전기영동법
3-5. 아가로오스 젤 전기영동법 (Agarose gel electrophoresis)
Ⅲ. 실험재
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분리 1분, 위 필터있는 튜브를 버린다.
(타)효소처리
SDW(멸균 3차 증류수) 13㎕
+10x H buffer 2㎕
+EcoR 1 1㎕
+Plasmid DNA 4㎕
37\'C incubator에서 1시간 반응 후
10x loading buffer (2㎕)를 사용하여 전기 영동
5.실험 결과
6.고찰
이번 실험을 통하여 PCR을 통한 Ge
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실험에서 Band가 연하게 나왔을 것으로 추측할 수 있었다. 이번실험에서는 소량의 plasmid DNA를 분리해내는 실험으로 실험을 통해 각각의 buffer가 사용되는 이유를 알 수 있었고 전기영동 장치로 얻어진 DNA를 확인할 수 있었다.
4. 참고문헌
(1) http
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