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Phosphate-buffered saline(PBS, 137mM NaCl, 2.7mM KCl, 4.3mM sodium phosphate(dibasic), 1.4mM potassium phosphate (monobasic))
- NaCl 8g, KCl 0.27g, Na2HPO4 (dibasic) 1.15g, KH2PO4 (monobasic) 0.2g을 녹이고 증류수로 1L를 맞춘다.
② TE buffer(10mM Tris-Cl, pH 8.0, 1mM EDTA, 20㎍/㎖ pancreatic RNase A,
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Sodium phosphate buffer 100ml가 된다.
2) Monobasic와 Dibasic을 섞어가면서 pH를 맞추는 방법
① 필요한 Monobasic의 양과 Dibasic의 양을 구한다.
② beaker에 증류수 100ml와 Monobasic과 Dibasic 시료를 넣은 후 magnetic bar를 넣어 stirrer에서 300RPM으로 돌려준다.
③ pH me
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phosphate buffer 용액을 8 mL 씩 가하고, 단백질이 우러나오도록 유리막대로
저어준다 (~5 분 정도).
4. 튜브를 원심분리기에 넣고 약 3 분간 원심분리 한다. 튜브를 원심분리기에 넣을 때, 두 개의
튜브는 서로 정반대편에 위치하여 균형을 맞추어
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1. 날짜 : 2012. 04. 30
2. 제목 : Enzyme activity에 대한 온도의 영향
3. 실험 목적 : Lipase의 활성에 대한 온도의 영향을 알아본다.
4. 재료
시약 – 0.1 M sodium phosphate buffer solution, 10 mM p-nitrophenol butyrate, 6.2 mg/mL lipase solution
기구 –
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sodium phosphate buffer(pH 7.0) 1.3㎖을 함유하는 반응용액을 실온에서 3분간 정치한 다음, 0.1unit xanthine oxidase를 첨가하여, 반응용액의 총량을 2㎖로 조절한 후, 290nm에서 1분간 흡광도의 변화를 측정하였다.
(4) Hydroxy radical에 의한 지질과산화 반응 억
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