[미생물학] Broth culture, streaking & spreading

목차

1. 실험제목

2. 실험원리 및 목적

3. 실험장치 및 기구

4. 실험내용 및 방법

5. 참고 문헌

본문내용

살짝 대어 식힌 후
배지 이에 접종액을 골고루 분산시킨다.
③ 배지 표면에 마른 지를 확인한 후에 펴트리접시를 뒤집어 배양기에 12～16시간 정도 배양하여
관찰한다.
▲ 주의사항
평판배지 표면을 적당하게 건조시켜서 집락 형성이 뚜렷하게 하고, 오염된 배지는 사용하지 말아야
하며 접종중 오염에 특히 주의해야한다. 주입 평판법의 경우 시험관에 든 한천배지에 균을 접종한
후 고루고루 섞이게 하여 미생물의 고른 콜로니 형성을 돕도록 하며 또, 시험관에 든 한천배지가
굳기 전에 평판배지 위에 spreading해야 한다. 백금이는 세균을 옮길 때마다 불꽃을 달구어 사용
하도록 하고, 배지를 잘 흔들어 세균을 현탁 시킬 때 가급적 기포가 생기지 않도록 한다. 마지막으로
페트리 접시에 배지를 주입하고 나서 조심스럽게 좌우로 흔들어 배지가 페트리 접시에 고르게
퍼지도록 해야한다.
● 배지제작시 사용되는 고압멸균기 (Autoclave)
증기는 수용액상의 멸균이 가능하게 한다. 이 처리는 고압멸균기라고 하는 금속기구내에 행해지는데
이 기기는 대기압보다 큰 압력의 증기로 채워진다. 따라서 멸균은 100℃이상의 온도에서 수행된다.
즉, 실험실의 고압멸균기는 보통 대기압보다 높은 1.06kg/cm2 의 증기압에서 작동되는데 이는 121℃의
온도에 상응한다. 몇 시간 동안 끓여도 살아남는 세균포자라도 이 온도에서는 급격히 사멸된다. 소량의
용액의 경우 20분정도 노출시킴으로써 멸균된다. 작동이 시작되면 기구내에 있던 모든 건조공기를
제거하고 증기로 대체시키는데 이것은 증기 트랩을 이용하여 이룩할 수 있다. 이 트랩은공기가 그것을
통해 나갈 때까지 열어 두고 공기가 증기로 포화되면 닫는다. 만일 약간의 건조 공기가 멸균기내에
남아 있으면 증기의 분압은 압력계기에 표시된 것보다 낮아지게 되며 따라서 온도도 낮아진다. 이러한
이유로 멸균기에는 항상 온도 및 압력계기가 장착되어 있어야 한다. 멸균기내의 온도는 처리하는
대상물에 특별한 표지용지를 포함시켜 열처리가 적당히 되면 종이의 색이 변하게 됨으로써 알게 할
수 있다.
5. 참고 문헌
미생물 실험서 이미래 / 윤재영 효일문화사 1995
최신일반미생물학 실험 홍순우 1978
The Microbial World Roger Y. Stanier외 3명 아카데미 1991
Microbiological Applications Harold J. Benson McGraw-Hill 1998

키워드

순수배양기술,   미생물,   spreading,   streaking,   도말평판법,   주입평판법,   Broth culture,   배양