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Solubilization : inclusion body에 urea나 guanidine HCL등을 넣어주어 hydrophobic interaction을 감소시켜 뭉쳐 있는 IB를 풀어주는 방법
Refolding: IB 를 Solubilization시켜주는데 사용한 denaturant의 농도를 감소시켰을 때 자가적으로 folding되는 방법
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단백질의 발현과 정제
His tag 특징
모든 숙주에서 발현가능
짧은 배열의 부가
임의의 vector로 자작 가능
부가에 따른 활성과 입체구조에의 영향 적다
Insoluble로 되고 Inclusion body를 만드는 경우가 많다
특이항체가 복수의 회사에서 입수가
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protein의 변성돠 침전을 일으킨다. 침전물은 원심분리에 의해서 제거되고 남은것들은 고도로 정제된 재조합 단백질이 들어있는 용액이 될 것이다.
재조합 생산의 2가지 특징은, 그러나 이는 이후에 inclusion body의 형성이나 purification tag의 포함
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proteins and genes as targets to accelerate drug discovery and development
2. Large-scale production of recombinant proteins
2.1 Optimization of product yield through manipulation of genetic construct and recombinant host cells
2.2 Large-scale cultivation of host cells for production of re
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된 것.
- 분자량(M.W)의 범위가 매우 넓다 – insulin(M.W 5,700, 55개의 amino acids), 효소(M.W 700~800만, 7~8만개의 amino acids) * 단백질(Protein)
- 아미노산
* 단백질의 구조
- 1차구조
- 2차구조
- α-나선구조
- β-구조
- 3차 구조
- 4차 구조
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콜라겐이란?
뼈, 연골, 이, 피부,물고기의 비늘 등
¼ of body protein
결합조직
자원 : 돼지, 소, 닭 등
Collagen의 구조
12종의 collagen
Type I이 제일 풍부
Type I,II,III – triple helix, Type IV – single helix
Helical region : (Gly-X-Y)n의 반복서열
X + Y
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Body
Chapter 3.
Cell Structure
:cell의 structure, function, function을 수행하는 mechanism
cells are the structural and functional units of all organisms
Microscopic observations of cells
Chapter 4.
Morecular Control Mechanism : Proteins and DNA
Section A.Binding Sites On Proteins
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질소의 정량분석
1. 원리
2. Kjeldahl 질소 정량법(중화 적정을 이용한 정량법)
3. 계산
1) 시료중의 질소량
2) 조단백질의 산출
4. Macro-Kjeldahl 법
5. 계산
6. Micro-Kjeldahl법
7. 계산
Ⅷ. 대두 BBPI(Bowman-Birk protease inhibitor)의 정량분석
참고문헌
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protein
49.02
0~3<cardic,
5<others
CBS
147
~
BC
Glucose
Negative
Negative
Leucocyte
Neg
Negative
Bilirubin
Neg
Negative
Keton body
Neg
Negative
Specific Gravity
1.015
1.003~1.030
Occult blood
++50
Negative
PH
5.5
4.8~7.5
Protein
Negative
Negative
Urobilinogen
Negative
~trace
Nitrite
Negative
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ative
Nitrite
Protein
Glucose
Ketone body
Billirubin
Erythrocytes
Urobillinogen
normal
normal
RBC
0~4/HPF
1~4/HPF
WBC
0~5/HPF
<1/HPF
Epithelial cell
<1/HPF
cast
None
<1/HPF
TORCH TEST
Description
결과
11/29
CMV IgG
Positive(16.8)
CMV IgM
Negative(0.3)
HSV IgG
Positive(3.5)
HSV IgM
Negative
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