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refractive index(굴절률)을 맞추기 용이하도록 하여, image의 clarity와 quality를 향상시킨다. 1. limit of resolution 계산방법
2. 1) Cy5
2) GFP(green fluorescent protein)
3) ReAsH
3. 4% Para-formaldehyde의 기능
4. blocking solution의 기능
5. mounting solution의 기능
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Blocking solution
-blocking이 필요한 이유
-BSA와 skim milk의 차이점
5) Antibody
-antibody란 무엇인가
-antibody의 상업적 용도
II. Materials & Methods
1)실험재료
2)SDS gel running의 방법 및 과정
3)transfer의 방법 및 과정
4)destaining과 blocking과정
5)primary antibody
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blocking solution(skim milk)에 희석하여 membrane에 처리한 후 1차 항체를 인지하는 2차 항체(anti-rabbit antibody)도 blocking solution에 희석하여 membrane에 처리한다. 이때 blocking solution은 background를 방지해주는 역할을 한다. 1차 항체는 목표 단백질을 인식하여
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blocking solution(0.1% BSA-PBS)을 well당 100ul씩 분주하였다. 이것을 4 에서 30-60min간 정치시켰다. 상등액을 제거하고 PBS로 3회 washing 하였다. Primary antibody를 0.05 Tween 20+PBST로 희석시킨 후, well당 50ul씩 분주하고 상온에서 30min간 정치하였다. 다시 PBS로 3
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solution, PBST, developer solution, fixer solution, blocking buffer (skim milk 5% in PBST), trasfer buffer
3.
실험 목적
및
원리 목적 SDS-PAGE 에 의한 단백질 분리 및 Western blot
원리
1) SDS – PAGE (Sodium dodecylsulfate – Polyacylamide Gel Electrophoresis)
SDS-PAGE는
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solution, PBST, developer solution, fixer solution, blocking buffer (skim milk 5% in PBST), trasfer buffer
3.
실험 목적
및
원리 목적 SDS-PAGE 에 의한 단백질 분리 및 Western blot
원리
1) SDS – PAGE (Sodium dodecylsulfate – Polyacylamide Gel Electrophoresis)
SDS-PAGE는
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blocking을 1시간 이상 overnight 한다.
Band가 전혀 나타나지 않음
항체역가가 약하거나 희석률이 부적당
block이 약할 경우
항원이 적을 경우
검출법이 적당하게 없을 때
적당한 buffer가 없을 때
반드시 알고 있는 일차항체를 positive control로 하고,
일
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solution을 쓰는 이유는 양전하를 띠는 polystyrene 위로의 antigen의 coating을 돕기 위해서이다. Skim milk를 사용한 이유에 대해 살펴보자. Skim milk는 지방을 뺀 우유다. 이것을 PBS에 섞어서 Antigen의 표면을 coating해주는데, 이는 blocking을 위해서 쓴다. 즉,
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solution 50ml를 정맥 주사
해독제나 중화제는 특정한 약물에 의한 것으로 알고 있을 때 사용
opiate 종류라면 naloxone을 투여하고 anticholinergic drug나 tricyclic 항우울제인 경우 physostigmine를 투여
▶ 위세척
- 섭취한 약물 제거하기 위해 사용
▶ 약물흡
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blocking of the active sites of the surface, and consequently the 2-electron reduction becomes predominant.
-500mV보다 작은 전압 범위에서는 흡착된 OH_ 감소와 표면의 활성 부위을 부분적으로 막는 흡착된 수소원자의 발생의 시작으로 4전자 환원반응이 덜 우세하다 따
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