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of DNA probe 실험을 진행하였다. 우선 추출한 DNA인 templats DNA와 random primer를 98도의 온도에서 10분동안 heating을 하였다. 그 후 바로 10분간 ice에 방치하였다. 여기서 사용한 random primer는 효소반응을 이용한 표지법이다. 즉, DNA의 생합성은 단일가닥
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ffer
viii) Elute with 50㎕ of elution buffer
R.T. 1\' (Room Temperature)
13k, 30\'\'
sup.
- 이 과정을 통해 column에 결합되어 있던 Plasmid DNA를 용출해내게 된다. 따라서 여과되어 아래의 tube에 들어간 것이 Plasmid DNA인 것이다.
x) Plasmid
III. Results
실험에 대한 결과물
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DNA at -20℃
Isolation of chromosomal DNA
1. cell culture 50ml
2. harvest at 4,000rpm, 10′
3. Resuspend in 5ml vs buffer
4. add lysozyme(4mg/ml)
5. RT에서 20′
6. add TSS buffer
7. RT에서 inverting
8. add 5M NaCl to final 1M
9. RT에서 5′
10. add the same volume of phenol : chloroform
11. 10′, 천천히
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isolation(Ammonium acetate 법
2. DNA Restriction (Vector 제작
3. pS44 DNA restriction
4. Electrophoresis
5. PCR (polymerase chain reaction
6. Elution ;Gene clean kitⅢ(Bio101
7. Ligation
8. Competent cell 제조 (DH5α) - CaCl2 법 사용
9. Transformation (Heat shock
10. screen
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DNA를 얻지 못하거나 추출 효율이 다소 떨어지는 경우도 있다.* 과정이 column에 비해서 많은 편이다.
※ PCR product purification
03. Ligation of termini created by restriction enzymes
이제 양끝에 제한효소부위를 가지는 insert DNA 와 동일한 제한효소 부위를 가
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DNA(1%) 임을 구하였다. DNA-PEI complex를 효율적으로 제거 하기 위하여 원심분리를 한다. 1 서론 /6
1.1 α-Amylase
1.2 E. coli
1.3 S. lividan
1.4 Structure of cells and release area
2 본론 /21
2.1 E. coli A /21
2.2 E. coli B /47
2.3 S. lividan A /69
2.4 S. lividan B /87
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of Molecular Biology fourth edition // p42-43 denaturation
전문진 // 2003년 8월 20일 // 현대의 생물공학과 생명공학 // p 69-71 PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 20
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DNA
sequence, (TTAGGG)n, present at the telomeres of human
chromosomes. Proc Natl Acad Sci USA 1988, 85:6622-6626.
2. Kim NW, Piatyszek MA, Prowse KR, Harley CB, West MD, Ho PL,
Coviello GM, Wright WE, Weinrich SL, Shay JW: Specific
association of human telomerase activity with immortal cells and
ca
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DNA와 일치하므로 해당 연구 결과를 인간에게 적용시킬 여지가 높아진다. 앞으로 줄기세포를 이용하여 근육분화에 대한 연구가 활발해 지리라 예상이 된다. 그리하여 기존에 정복하지 못했던 근육관련 질병들을 머지 않아 극복해 낼 수 있을
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